基于Xh-CL基因敲除小鼠模型的雷公藤内酯醇肝外组织代谢与毒理研究

雷公藤内酯醇是中药雷公藤中主要有效成分之一，具有抗肿瘤、免疫抑制、抗炎及抗生育等药理价值。然而雷公藤内酯醇同时具有较强的毒副作用，具体表现为消化系统、泌尿系统、生殖系统及心血管系统等毒性。本项目在归纳分析前期研究结果的基础上，提出假设：肝外组织细胞色素P450的代谢活性是影响雷公藤内酯醇肝外组织毒性的重要因素。项目拟运用申请人在纽约州立大学读博期间建立的Xh-CL基因敲除小鼠模型对此假设进行 验证。Xh-CL小鼠具有正常的肝脏P450代谢活性和极低的肝外组织P450代谢水平，基于Xh-CL小鼠的给药实验将直接揭示肝外组织P450代谢对雷公藤内酯醇毒性的影响。本项目的研究结果将为如何评价雷公藤内酯醇的给药风险，如何降低该药的临床毒性提供重要的实验依据。

本项目提出的假说为“肝外组织自身的细胞色素P450 的代谢活性是影响雷公藤内酯醇肝外毒性的重要因素”。本课题组运用Xh-CL 基因敲除小鼠模型对此假说进行验证，进而明确雷公藤内酯醇导致的多系统毒性是否与小鼠肝外P450酶系代谢相关，为如何降低雷公藤内酯醇的毒性和临床合理用药提供理论依据。项目主要完成研究工作及阶段性成果如下：.1. 从美国纽约州卫生部Wadsworth实验中心Xinxin Ding教授实验室引进Xh-CL小鼠品系，并完成品系的扩大繁殖和基因型鉴定。.2. 完善了评价小鼠雷公藤内酯醇亚慢性毒性作用的方法，并建立了基于UPLC法的小鼠血液中雷公藤内酯醇药代动力学研究。.3. 通过对比Xh-CL小鼠和野生型C57BL/6小鼠中雷公藤内酯醇的毒理指标和药代动力学曲线，课题组发现肝外组织中P450 酶的活性对雷公藤内酯醇毒性和代谢速率无明显影响（否定了项目假说）。结果提示雷公藤内酯醇的减毒研究主要应关注肝脏中P450 酶的活性。.4. 探讨了茅苍术提取物对小鼠肝脏CYP3As的表达水平的影响及其对雷公藤内酯醇的减毒增效作用影响。首次发现雷公藤内酯醇与茅苍术水提物联合给药可降低其毒性作用，并且抗炎作用优于雷公藤内酯醇单独给药。.5. 研究了生、炙甘草对细胞色素P450酶系中CYP3As的调节作用并比较两者对雷公藤内酯醇解毒效果的差别。研究显示生、炙甘草均对CYP3As有诱导作用，而生甘草的诱导作用更为显著；并且生甘草对雷公藤内酯醇的解毒效果优于炙甘草。.研究工作在国内外学术期刊发表论文4 篇，其中核心期刊收录2 篇；待发表SCI论文2 篇；获授权发明专利1 项，申请发明专利一项；培养硕士研究生3 名。