miRNA-218介导的NF-κB活化在十二指肠球部溃疡发生中的作用和机制

十二指肠球部溃疡（DU）和胃癌是幽门螺杆菌（Hp）感染的两个截然不同的主要临床结果，我们前期工作发现，dupA是与DU发生相关的毒力因子，它在激活NF-κB的同时，还可以激活肿瘤抑制基因p53转录因子。Hp通过miRNA-218来影响与NF-κB调控相关的靶基因表达。本项目拟以cagA做对照，使用基因敲除菌株，在体内外研究miRMA-218引起的p53介导NF-κB激活在DU发生中的作用和dupA在其中的角色。检测Hp感染的不同病变组织miRNA-218、p53与dupA基因型的相关性；应用动物模型和细胞株检测dupA对胃黏膜p53和miRNA-218表达的影响；应用EMSA、荧光素酶报告质粒、RT-PCR、转染和ChIP方法研究dupA、p53与miRNA-218的相互作用和调控环节，以明确Hp引发DU的分子机制，以及可能存在的与胃癌相制约的因素，拓展Hp相关病变防治的新思路。

十二指肠球部溃疡（DU）和胃癌是幽门螺杆菌（Hp）感染的两个截然不同的主要临床结果，胃癌的发生经历Hp感染、浅表性胃炎、萎缩性胃炎、肠化等基因突变（包括主要的p53基因）过程。我们前期已经发现，dupA是与DU发生相关的毒力因子，Hp通过miRNA-218来影响与NF-κB调控相关的靶基因表达，在胃癌发生发展过程中起抑制作用。我们的研究利用公认的毒力因子cagA做对照，使用dupA基因敲除菌株，在体内外研究miRMA-218引起的p53介导NF-κB激活在DU发生中的作用和dupA在其中的角色。我们免疫组化研究发现，dupA与胃粘膜组织学的萎缩和肠化负相关，而p53基因突变在萎缩和肠化有增加趋势，体外研究发现，dupA与能够诱导胃粘膜miR-218的高表达，EMSA和荧光素酶报告质粒发现，dupA通过AP-1在AGS细胞内结合于p53基因的调控区，参与该基因的表达调控，cagA与此无关。因此，DU相关的Hp毒力因子dupA参与了p53与miRNA-218的之间可能的相互作用，它的作用使得miRNA-218表达增加，p53突变降低，在胃癌的发生发展中起相反的作用，但没有找到miRNA-218直接作用与p53的靶位。