利用生物素标记/蛋白质组法研究APP基因家族胞内段在神经元细胞中的转录分子作用网络

β-淀粉样肽前体蛋白APP是I型跨膜糖蛋白,在中枢神经元细胞中高度表达。 APP蛋白在细胞内可被β/α/γ-Secretase依次水解，释放Aβ肽,以及胞内段AICD.其中Aβ肽是老年痴呆症（AD）老年斑形成的主要致病因子.胞内段AICD可能作为释放的信号分子,推测和老年痴呆症的发病也是息息相关。由于AICD分子量很小,在细胞内含量少且易降解,至今没有直接的实验证据验证由AICD介导的核转录复合物的存在。本实验中我们将以神经元细胞为模型，利用生物素标记/蛋白质组法研究AICD转录复合物的内容。首先通过将APP基因家族胞内段在神经元细胞内过表达并生物素化,再以超速离心获得核提取物,经过链霉亲和素柱提纯蛋白复合物，以凝胶电泳分离并结合质谱法获得复合物的分子信息,建立AICD核转录调控网络的模型.并分析此模型中重要分子与神经元分化的关系,以及与APP蛋白自身代谢调控以及Aβ肽在脑内代谢的联系等。