高转移乳腺癌高表达PDGFC的转录后调节机制及其在成纤维细胞活化中的作用

肿瘤微环境中基质细胞聚集与活化促进乳腺癌恶性演变，而肿瘤细胞对基质细胞募集及活化的研究相对较少。RNA结合蛋白HuR在转移性乳腺癌中高度活化，我们发现高转移乳腺癌细胞高表达血小板源性生长因子C（PDGFC），后者是成纤维细胞聚集和活化的重要调节基因。生物信息学发现，PDGFC的RNA含有HuR结合位点，高度提示"HuR-PDGFC-成纤维细胞活化"通路的存在并参与肿瘤恶性微环境形成。本课题拟通过RNA-IP和报告基因等明确HuR增强PDGFC表达的分子机制，采用肿瘤细胞和成纤维细胞共培养体系，干扰肿瘤细胞来源的HuR-PDGFC调节通路，观察成纤维细胞增殖和活化的影响，确立乳腺肿瘤HuR-PDGFC-成纤维细胞活化通路的存在，在此基础上，通过不同处理的乳腺肿瘤细胞和成纤维细胞混合体的裸鼠荷瘤模型，分析该通路参与恶性肿瘤微环境的形成和促进肿瘤恶性演变的作用，为预防肿瘤转移提供新思路和新策略。

肿瘤微环境中基质细胞聚集与活化促进乳腺癌恶性演变，而肿瘤细胞对基质细胞募集及活化的研究相对较少。在本项目的资助下，课题组取得了以下发现：1）我们通过qPCR、Western Blot和免疫组化等方法发现恶性肿瘤中HuR高表达，与此一致，肿瘤中PDGFC也高表达；HuR水平和PDGFC水平与肿瘤恶性度呈正相关，与患者生存期呈负相关；2）通过荧光素酶报告系统、RNA稳定性检测等实验证实HuR可以通过与PDGFC3’UTR上的ARE元件相互作用，增强PDGFC的稳定性，促进PDGFC的表达；3）细胞学实验证实HuR高表达的细胞来源培养基可以促进成纤维细胞活化，该过程中PDGFC发挥重要作用，成纤维细胞的活化进一步加剧了肿瘤细胞的恶性表型；4）HuR促进PDGFC的表达可能与其拮抗miR382功能相关。其中部分成果已经投稿中。本项目进一步揭示了HuR的生物学功能及其促进肿瘤转移的机制，为预防肿瘤转移提供新思路和新策略，丰富对肿瘤的增殖、转移、血管生成的认识。