PRMT5在异粘蛋白（MTDH）介导的肝细胞癌转移中的作用及其机制研究

Epithelial-mesenchymal-transition (EMT) is a key process in tumor metastasis. Our previous study showed that metadherin (MTDH) is a key molecular in HCC metastasis, which can promote HCC metastasis via epithelial-mesenchymal-transition (EMT). Recently, using Co-Immunoprecipitation and Mass Spectrometry, we found that MTDH can form a complex with PRMT5. PRMT5 (Protein arginine methyltransferase 5) belongs to the family of methyltransferase that catalyze arginine methylation. Dysregulation of PRMT5 was shown in several tumors, it is also reported to play a part in EMT. We therefore inferred that PRMT5 may function in MTDH-mediated EMT and metastasis in HCC. Based on these findings, we will further investigate the expression of PRMT5, and its impact on HCC metastasis; we will also explore function of MTDH-PRMT5 complex in HCC metastasis by a series of in vitro and in vivo experiments. These studies might provide a new viewpoint for the research of HCC metastasis, as well as experimental and theoretical basis for HCC therapy.

上皮-间质转化是影响肿瘤转移的重要因素。我们的前期研究发现，异粘蛋白（metadherin， MTDH）是肝癌转移的关键分子，通过诱导肝癌细胞上皮-间质转化从而促进肝癌转移。近期，我们采用免疫共沉淀结合质谱技术，首次发现MTDH与PRMT5可以形成复合物。PRMT5是一种催化精氨酸甲基化的蛋白酶，其异常表达与多种肿瘤具有密切的关系。有研究显示，PRMT5在上皮-间质转化中也具有一定的作用。由此我们推测，PRMT5在MTDH介导的肝癌细胞上皮-间质转化及肝癌转移中可能发挥重要作用。本课题拟在前期工作基础上，进一步探讨PRMT5在肝癌中的表达及其对肝癌转移以及病人预后的影响；并通过一系列体内体外实验，从分子、细胞、动物、组织标本等角度研究PRMT5在MTDH介导的肝癌转移中的作用及其分子机制。从而为预测肝癌预后和寻找新型靶向治疗靶点提供新的实验和理论依据。

我们的前期研究发现，异粘蛋白（metadherin，MTDH）是肝癌转移的关键分子，通过诱导肝癌细胞上皮-间质转化从而促进肝癌转移。近期，我们采用免疫共沉淀结合质谱技术，首次发现MTDH与PRMT5可以形成复合物。本研究进一步探讨了PRMT5在肝癌中的表达，及其在异粘蛋白介导的肝癌转移中的作用机制。利用免疫组化技术对323例肝细胞肝癌病人肿瘤及正常肝脏组织进行免疫组化染色的结果显示，PRMT5随MTDH增加而表达升高，且向核外转移；同时，细胞核外的β-catenin向核内转移。预后分析提示，PRMT表达对病人的总生存期(C)及复发率(D)无显著影响。Prmt5核内表达占优势的病人总生存期(E)更长，复发率(F)更低。MTDH高PRMT5核外组病人生存期明显短于MTDH低PRMT5核内组(G)，复发率则明显高于MTDH低PRMT5核内组(H)。功能实验显示，过表达PRMT5能促进肝癌细胞的增殖及移动能力，而敲除PRMT5能抑制其增殖及转移，且能抑制MTDH对肝癌细胞的作用。进一步的共沉淀实验显示，PRMT5与 β-catenin 能竞争性地结合MTDH上的同一区域，从而导致β-catenin向核内转移，进而上调WNT/β-catenin信号通路。我们的研究显示，MTDH/PRMT5功能复合体能通过上调WNT/β-catenin信号通路从而促进肝癌转移。MTDH联合PRMT5能准确预测肝癌患者术后的预后,预测效率优于单用MTDH。