甘草内生菌有效菌株代谢产物与甘草药效成分的相关性研究

The new resources and new resources seeking natural drugs is a new topic to solve the new problem of scarcity of wild medicine.This topics had isolated and cultivated 132 endophytes (119 bacteria,13 fungi) from Gansu Ural licorice wild products and Gansu uralensis cultured glycyrrhiza，preliminary Studying.It's effective strains(JTYB-001 JTZB-001), total flavonoids of the active ingredients, saponins and water decoction have a strong inhibition of Staphylococcus aureus and Streptococcus pneumoniae.And have a treatment for mouse pneumonia infected with Streptococcus pneumoniae.It shows that its endophytes and host have the same or similar biological activity.It inferred that the effective strain metabolites of endophytic fungus and host pharmacodynamic material active ingredient have a certain correlation.This topics in past work Foundation intends to uralensis glycyrrhiza endophytes and the licorice effective components for separation, and training, and extraction and analysis, and compared with licorice decoction, using body both inside and outside bacteriostasis, and anti-inflammatory,and relieving cough and reducing sputum,pharmacodynamics method, observation " medicinal ingredient in effective bacteria-host-host plants " between of Pharmacological action, Will have the same pharmacological action of active ingredients for further analysis. And to this found the relationship between licorice endophytes effective strains metabolism products and licorice efficacy activity components.

寻求天然药物的新资源、新药源是解决野生药物资源匮乏的新课题。本课题组已对甘肃乌拉尔甘草野生与栽培品进行了分离培养并得到内生菌132株（内生细菌119株，内生真菌13株），经初步研究其有效菌株（JTYB-001、JTZB-001），有效成分总黄酮、总皂苷及水煎剂对金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌均有较强抑制作用，并对感染肺炎链球菌小鼠肺炎有治疗作用，表明其内生菌与宿主间具有相同或相似的生物活性，推断内生菌有效菌株代谢产物与宿主药效物质的活性成分具有一定的相关性。本课题在以往工作基础上拟对乌拉尔甘草内生菌及甘草有效成分进行分离、培养、提取和分析，并与甘草水煎剂相对照，利用体内外抑菌、抗炎、止咳化痰等药效学方法，观察"有效菌株-宿主药用成分-宿主植物"间的药理作用，将具有相同药理作用的活性成分做进一步的分析，以此发现甘草内生菌有效菌株代谢产物与甘草药效活性成分间的关系。

本课题通过对甘肃野生与栽培乌拉尔甘草内生菌代谢产物药效学及有效内生菌代谢产物的化学成分研究，揭示甘草内生菌代谢产物与宿主植物在药效及化学成分方面的关联，为甘草内生菌代谢产物作为微生物资源应用提供依据。对野生与栽培乌拉尔甘草内生菌分离纯化，体外抑菌实验筛选有效菌株，鉴定菌种，利用紫外分光光度法和高效液相色谱法将具有体外抑菌的有效菌株与甘草黄酮类、皂苷类成分对比分析。提取野生与栽培甘草中的总黄酮和总皂苷类成分，优选提取工艺，并经体外抑菌评价活性。进行上述有效菌株代谢产物、甘草药效成分与甘草水煎液体内抑菌、抗炎、止咳化痰等药效学研究。对具有上述活性的有效菌株代谢产物与甘草活性成分进行成分分析比较。最终分离出140株内生菌，其中野生63株，栽培77株。总黄酮、总皂苷及筛选的20株内生菌有效菌株发酵物均具有不同程度体外抑菌作用。10株（JTYB029、JTZB002、JTZB005、JTZB006、JTZB014、JTZB020、JTZB043、JTZB058、JTZB060、JTZB063）体内对金黄色葡萄球菌或肺炎链球菌有抑菌活性，7株（JTYB006、JTYB029、JTYF023、JTZB005、JTZB006、JTZB060、JTZB063）有体内外抗炎活性，6株（JTYB029、JTZB005、JTZB006、JTZB043、JTZB060、JTZB063）有止咳活性，5株（JTYB029、JTZB005、JTZB006、JTZB058、JTZB063）有祛痰活性，且甘草内生菌发酵物活性分别优于或等同于甘草总皂苷、总黄酮、水煎液。以上有效菌株发酵物粉末中总黄酮含量1.13~2.24mg·g-1，总皂苷含量50.01~71.93mg·g-1，甘草酸铵含量0.012~0.074mg·g-1，甘草苷含量0.01~0.06 mg·g-1，甘草素含量0.003~0.027 mg·g-1。初步推测总黄酮、总皂苷是甘草内生菌抑菌和抗炎作用的有效部位，但甘草内生菌代谢产物中可能还存在其他未知有效部位，且代谢产物的总黄酮、总皂苷中还含有其他具有抑菌、抗炎作用的活性成分，有待进一步研究。本课题初步验证了甘草内生菌代谢产物抑菌、抗炎、止咳化痰药理活性，初步明确甘草内生菌代谢产物含有与宿主植物甘草相同的药效物质基础，为今后药用植物内生菌研究提供借鉴。