促红素促进糖尿病小鼠心肌梗死血管新生的机制研究

心肌梗死后代偿性血管新生是心肌对抗缺血损伤的重要机制，但糖尿病导致这种机制严重受损。促红素有促进血管新生的作用，但能否促进糖尿病心肌梗死后的血管新生尚无定论。本研究拟用db/db糖尿病小鼠的心肌梗死模型，系统观察促红素:(1)对心室重塑的影响：超声心动图及血流动力学监测；(2)对血管新生的影响：SPECT扫描和心脏冰冻切片，比较促红素组与安慰剂组心肌梗死面积、血管密度及新生血管的变化；(3)影响血管新生（是或否）的机制：由于AMPK-eNOS可能是促红素作用的重要信号通路，故同时检测上述模型心肌中此信号通路关键靶点成分的表达，并在提取的正常小鼠骨髓内皮祖细胞体外实验中验证；高糖环境下，观察促红素与AMPK及eNOS抑制剂对体外培养的内皮祖细胞的增值、分化、迁移及血管形成的影响。本实验目的：阐明促红素能否促进糖尿病心肌梗死的血管新生，为治疗糖尿病心肌梗死提供新的治疗靶点。

急性心肌梗死后代偿性血管新生是心肌对抗缺血性损伤的重要机制，但这种代偿性机制在糖尿病时严重受损，促血管新生的治疗策略对糖尿病心肌梗死的患者尤其重要，有可能成为临床治疗的新方向。既往研究显示促红细胞生长素（简称促红素）对非糖尿病小鼠心肌梗死时有促血管新生的作用。糖尿病时受损的主要信号通路之一，AMPK-eNOS信号通路，与缺血后心肌保护和促红素激活的信号通路有重叠，因此我们推断促红素可通过激活此通路对糖尿病心肌梗死产生促血管新生的作用。本研究的总体目标是探讨促红素对糖尿病心肌梗死血管新生的作用和机制，为阐明促红素促血管新生的机制和寻找对糖尿病心肌梗死治疗新靶点提供理论基础和依据。本研究利用db/db 糖尿病小鼠的心肌梗死模型，系统观察促红素:(1)对心室重塑的影响：超声心动图及血流动力学监测；(2)对血管新生的影响：SPECT 扫描和心脏冰冻切片，比较促红素组与安慰剂组心肌梗死面积、血管密度及新生血管的变化；(3)影响血管新生（是或否）的机制：由于AMPK-eNOS 可能是促红素作用的重要信号通路，故同时检测上述模型心肌中此信号通路关键靶点成分的表达，并在提取的正常小鼠骨髓内皮祖细胞体外实验中验证；高糖环境下，观察促红素与AMPK及eNOS抑制剂对体外培养的内皮祖细胞的增值、分化、迁移及血管形成的影响。为进一步验证促红素对冠脉内皮功能的影响，本研究额外增加了离体冠脉培养实验，该部分研究首次证明促红素能够通过内皮系统直接影响冠脉收缩/舒张功能。为建立活体血管新生检测的核医学方法，我们前期还开展了心梗中华小型猪模型的实验，为后续的小动物实验打下了基础。本实验已完成了原定的全部细胞实验及大部分动物实验，初步证实了促红素能够促进糖尿病心肌梗死的血管新生及其相关机制。