细胞间缝隙连接在脑胶质瘤基因治疗中的作用

含大鼠心肌间隙连接蛋白基因Connexin43 cDNA的质粒载体在大肠杆菌中扩增，酶切电泳回收cDNA片段，与真核表达载体pED4片段连接，重组体用脂质体包裹围染中国仓鼠卵巢细胞（CHO），氨甲喋呤（MTX）加压筛选抗性克隆得到分别可以抵抗抗MTX浓度为50、100、200nM的细胞株。用带单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV-tk）的逆转录病毒载体感染Connexin43高表达细胞，G418筛选抗性克隆得到带tk的Connexin43高表达细胞，配制不同tk（+）/tk（-）比例细胞悬液，培养后再加入用羟已基无环鸟苷（GCV），发现Connexin43表达高的混合细胞系受抑制更明显。不同Connexin43表达水平的tk（+）/tk（-）混合细胞在动物体皮下接种，用GCV治疗，发现tk（+）细胞对tk（-）细胞传递GCV杀伤作用的效率有所提高，提示细胞间间隙连接通道的量和旁观者效应的效率有关。