LncRNA调控NAA10基因影响大肠癌发生发展的机制研究

Colorectal cancer(CRC) is a common malignant tumor, the present study indicates that lncRNA associated with occurrence, development and poor prognosis in CRC, but the mechanism of action of colorectal cancer regulated by lncRNA is still poorly understood. Previously, we found that overexpression of miR-342-5p and miR-608 inhibited Naa10p mRNA expression, and inhibition of colorectal cancer. Preliminary experiments screened RP11-400N13.3 with high expression and reminder its importance in five pairs of CRC tissues and Paracancer by LncRNA chip Screening, but the mechanism is still unknown. Therefore,we propose a hypothesis: RP11-400N13.3 may influence CRC by RP11-400N13.3-miR-342-5p、miR-608-NAA10 signal pathway, we have not seen the relevant report at home or abroad at present. To verify the hypothesis, we will discuss the important role in the mechanism of RP11-400N13.3 in CRC from molecular, cell, tissue, animal models, etc. Expliciting the mechanism of occurrence and metastasis be affected by this signal pathway in CRC, reveal the pathogenesis of CRC from a new point of view by lncRNA, and provide new ideas for its prevention.

大肠癌是常见的恶性肿瘤，目前研究发现IncRNA与大肠癌发生、发展、不良预后有关，迄今lncRNA调控大肠癌的作用机制知之甚少。前期研究证实miR-342-5p与miR-608抑制NAA10表达进而抑制大肠癌发生，预实验在5对大肠癌组织和癌旁组织lncRNA 芯片筛选出高表达RP11-400N13.3，提示lncRNA在大肠癌发生中的重要作用，但其作用机制不清楚。为此提出假说：RP11-400N13.3可能通过RP11-400N13.3--miR-342-5p、miR-608--NAA10信号通路，影响大肠癌发生、转移，国内外未见文献报道。为了验证这假说，拟从分子、细胞、组织以及动物模型等方面，探讨RP11-400N13.3在大肠癌中的重要作用机制，明确此信号通路影响大肠癌发生、转移的作用机制，从lncRNA这个新视点为揭示大肠癌发生机制奠定基础，对其防治提供新思路。

本项目前期研究发现在癌组织中RP11-400N13.3 和 RP11- 417E7.1的表达水平显著上调，结合生物信息学发现RP11-400N13.3对miR-342-5p和miR-608均有调控作用，研究选定RP11-400N13.3--miRNAs--(miR342-5p 和miR-608)--NAA10信号通路。在RNA pull-down实验检测miR-342-5p 和 miR-608，并在大肠癌组织和癌旁组织中用qPCR进行验证时发现，miR-342-5p 和 miR-608未能与RP11-400N13.3直接结合，且RP11-400N13.3与miR-342-5p 和miR-608在组织中的表达水平不一致，重新调整研究思路，在前期研究基础上并结合生物信息学预测重新筛选到可能与RP11-400N13.3和RP11-417E7.1结合的miR-4722和miR-661及靶蛋白P2RY8，继续进行后续实验。.通过大肠癌细胞株SW620、大肠癌癌组织和癌旁组织、小鼠模型，采用生物信息学、real time PCR、Western blot、RNA干扰等手段，从分子、细胞、组织以及动物水平等证明：miR-4722和miR-661能分别逆转lncRNA RP11-400N13.3和RP11-417E7.1对结肠癌恶性表型的促进作用，即lncRNA RP11-400N13.3和RP11-417E7.1的癌基因活性是通过结合miR-4722和miR-661得以发挥的，明确了RP11-400N13.3和RP11-417E7.1与miR-4722和miR-661的关系及具体作用机制，证实了RP11-400N13.3-miR-4722-P2RY8和RP11-417E7.1-miR-661-P2RY8两条信号通路在大肠癌发病机制中的作用，为探索大肠癌的发病机制、临床治疗、阐明新的大肠癌治疗机制提供了新思路，奠定了基础。.本研究已发表论文4篇，其中SCI 2篇，北大核心1篇，科技核心1篇，还有一篇SCI论文待发表，已完成目标任务。培养硕士研究生4人，已完成目标任务。发表并授权实用新型专利1项，课题立项3项，获云南省高层次卫生计生技术人才培养计划3项，职称晋升、晋升博士研究生导师2人，均超额完成任务。