Tob基因在大肠癌发生发展中的调控机制研究

Recent studies showed that Tob has the function of anti proliferation and is deficient in many types of cancer. However, we observed raised Tob expression in colon cancer tissues, increased proliferation in Tob overexpressed cancer cells, raised expresssions of Tob in APCmin/+ mice polyps samples, and reduced polyps malignancy in Tob-/-/APCmin/+ mice, indicating that Tob might play roles in induction of colon tumorigenesis. However, the mechanism of Tob in tumorigenesis is largely unknown. We first use overexpression or knock out methods to alter the expression of Tob and study its effect on cell growth, differenciation and migration. Then we studied the correlations between Tob and Wnt and EGFR pathways, which are closely related with colorectal tumorigenesis. In animal experiments we plan to use APCmin/+, Tob-/-/APCmin/+ genetic mouse models plus AOM +DSS chemical models to study the expression and in vivo mechanisms of Tob in the colon tumorigenesis. In clinical studies the expression models of Tob were measured in tissues from different stages of colon cancer. The Tob expressions were also compared between tissues from fifty 6 months recurrence and non-recurrence patients to find out the relatioinship between Tob expression and the progonosis of colon cancers. This study will disclose the mechanisms of Tob in colorectal tumorigenesis and provide insight of Tob related target therapy for colorectal cancers.

近期研究发现Tob基因有抗增殖作用，在多种癌症中表达缺失。然而我们观察到Tob在肠癌组织中表达增高，促进肠癌细胞增殖，在肠癌模型鼠APCmin/+肠息肉中表达升高且APCmin/+小鼠与Tob敲除鼠杂交后息肉恶性度降低，提示Tob促进肠癌发生发展，但机制未知。我们拟先通过改变Tob在肠癌细胞中的表达，观察对细胞增殖及转移的影响，并进一步检测Tob与肠癌发生发展密切相关的Wnt和EGFR信号通路的相互影响，探索Tob在肠癌中表达升高及促癌分子机制。动物实验采用APCmin/+小鼠、Tob-/-/ APCmin/+双敲小鼠及AOM+DSS化学诱导肠癌小鼠模型来探讨Tob基因体内动态表达及其在肠癌发生中的作用。临床实验将检测Tob在不同阶段肠癌组织以及术后未复发及复发的切片样本中的表达，推断Tob对肠癌发展及预后的影响。研究力争揭示Tob在肠癌中的调控机制，为肠癌诊治提供分子靶标和理论依据。

肠癌是全球第三大常见癌症之一，严重危害着人类的健康。各种内外因相互作用，结合多阶段、多步骤和多基因参与的一系列分子事件，最终发展为肠癌。在肠癌发生发展涉及到的诸多信号通路中，Wnt信号通路的过度激活被认为最为关键的起始事件。Tob1属于TOB/BTG抗增殖家族的一员，被多项研究证实具有抗增殖的功能，在多种癌症中缺失或失活，然而，Tob1在肠癌中的作用机制尚不清楚。在本项目的研究中，我们发现Tob1在肠癌中高表达并促进了肠癌的发生发展。首先，我们利用临床组织样本和组织芯片，经过免疫组化及统计分析，发现Tob1在肠癌组织中存在高表达。同样的，Tob1在多种肠癌细胞系中也同样异常的高表达。接着我们对Tob1在肠癌中扮演的角色进行深入研究，结果发现，与其它癌细胞的核定位不同，肠癌中的Tob1主要定位于细胞质，而Tob1核定位是其发挥抑癌作用的必需步骤，这也提示了Tob1在肠癌中不同于其它癌症调控方式的原因。进一步的机制研究发现：Tob1能够与β-catenin结合并提高其稳定性，最终激活Wnt/β-catenin信号通路，同时，被激活的Wnt/β-catenin信号通路也能够提高Tob1的表达，二者之间形成正反馈调节环，最终促进结肠癌细胞增殖。最后，Tob1在ApcMin/+小鼠的肠癌细胞株中同样高表达，在AOM/DSS化学诱癌模型和ApcMin/+小鼠模型中，Tob1缺陷都能降低肿瘤形成及癌细胞的增殖。综上所述，我们从临床、体外及体内三个方面，证明了Tob1在肠癌中独特的促癌角色，并阐明了发挥作用的具体分子机制，为肠癌治疗提供了潜在的靶点。