HJURP基因多态性与肝癌遗传易感性的关联研究

寻找能预测原发性肝癌发生风险的有效指标一直是亟需解决的问题。已知HJURP（Holliday Junction Recognition Protein，霍利迪交界认识蛋白）基因异常表达与肿瘤的发生发展密切相关；HJURP基因也存在单核苷酸多态性位点（SNP），但尚未见有关其SNP位点对HJURP基因功能的影响，进而改变个体的肿瘤易感性的报道。申请人在前期曾系统性选取了HJURP基因上等位频率大于10%的非同义cSNP位点，通过关联分析发现了两个SNP位点与肝癌易感性有显著性关联。本项拟在此基础上，通过SNP分型和关联分析查找更多阳性关联SNP位点并在更多个人群中进行重复验证，之后通过功能验证实验明确这些SNP位点的功能，揭示HJURP基因多态性与肝癌易感性的遗传学关联背后蕴含的生物学意义，获得具有潜在应用价值的基因多态性位点（群），为肝癌高危人群的预警和筛查提供理论依据。

对比计划书中原定的研究内容，课题组基本完成了主要的研究指标，详细完成情况如下：.（1）确认了HJURP基因上所有标签单核苷酸多态性（SNP）位点（24个）并使用Taqman基因分型方法对这24个位点进行了基因分型；在大样本的病例-对照研究中（548例肝癌病例，560例正常对照）分析24个标签SNP位点的多态性与HBV相关性原发性肝癌遗传易感性的关系。非条件Logistic回归分析使用性别、年龄、吸烟、饮酒和家族史进行校正。结果发现两个SNP位点：rs3771333和rs626110与肝癌的易感性存在显著性关联。但经过Bonferroni校正后，仅有rs3771333位点依然存在显著性。研究结果表明，HJURP的rs3771333位点的单核苷酸多态性与原发性肝癌易感性存在显著关联（为国内外首次发现）。 .（2）采用免疫组化方法验证了rs3771333位点不同基因型与HJURP基因蛋白表达的差异存在相关性。结果显示，在20例肝癌组织中，HJURP蛋白在肝癌组织中阳性表达率为100%（20/20），阴性表达0例。但阳性表达程度存在差异，呈弱阳性表达6例，强阳性表达14例。与A/A基因型的携带者相比较，A/C和C/C基因型携带者的癌组织中HJURP 蛋白水平显著降低（呈弱阳性）。.（3）在较大样本量的肝癌病例中，采用免疫组化方法分析肝癌癌组织中HJURP蛋白表达状况。在88例肝癌病例的癌组织中，HJURP蛋白的阳性表达率为95.5%（84/88），说明肝癌组织中HJURP蛋白有非常高的阳性表达率。由于在肝癌组织中采用免疫组化方法检测HJURP蛋白的阳性表达率很高，因此无法进一步对HJURP蛋白表达状况与肝癌的疾病进展及预后的关系进行研究。.（4）探讨了HJURP rs3771333多态性与原发性肝癌临床表型的关系。在146例肝癌患者中，HJURP rs3771333位点的AA、AC和CC基因型的频率分别为69.2%（101/146）、29.5%（43/146）和1.3%（2/146）。在使用性别、年龄等5个因素校正后，HJURP rs3771333多态性与HCC的原发灶T分期、门静脉侵犯、远处转移等临床特征均无显著性相关。.（5）协助培养研究生4名，其中1名已经通过论文答辩，1名将于今年毕业。已撰写英文和中文论文各1篇，其中中文稿件已经被正式录用拟于今年发表。