用标记引物原位PCR方法研究丙型肝炎的发病机制

建立光敏生物素补骨脂素标记引物原位PCR方法，它具有较高的敏感性和特异性，并省时成本低，结果表明急性丙肝患者HCV主要存在血清及肝细胞中，而慢性患者PBMC（T及B细胞）中有HCV存在和复制无论Ⅱ型还是Ⅲ型HCV主要分布于形态正常的肝细胞及PBMC细胞浆中，血清、肝组织及PBMC中HCV的基因分型一致，提示HCV 对肝细胞的皮坏不是病毒的直接损伤，而可能以免疫损伤为主；HCV并不象HBV那样易整合到宿主细胞核中，这可能不是丙肝慢性化的主要因素；而PBMC中HCV的持续感染和复制可能影响患者的免疫功能，与丙肝的慢性化有关。经干扰素治疗的患者血清HCV清除后PBMC中仍有持续的HCV感染。因此，PBMC不仅可以作为HCV肝外的复制场所，也可以作为干扰素治疗的时间及预测其疗效的指标。