NODs信号通路在仔猪免疫应激中的作用及其营养调控

营养调控是克服或缓解猪"免疫应激"的重要手段之一，然而，由于猪免疫应激的分子机制尚不清楚，使得营养调控措施针对性不强或效果不明显。核苷酸结合寡聚化结构域（NODs）启动了实验动物的炎症反应，该研究结果为探索猪免疫应激的分子机制提供了新的思路。本项目建立仔猪免疫应激模型，研究免疫应激对NODs（NOD1和NOD2）在仔猪肠道、免疫系统、神经内分泌系统、肌肉和脂肪组织的分布和基因表达水平的影响，并进一步研究抑制NODs信号通路关键分子对仔猪免疫应激反应的影响，以探索NODs信号通路是否启动仔猪的免疫应激。在此基础上，进一步研究营养素（n-3PUFA）对NODs信号通路的调节作用，以探索营养素（n-3PUFA）是否可通过负调控NODs信号通路的关键分子从而缓解猪的免疫应激。本研究结果将为揭示猪免疫应激的分子机制，以及为通过营养调控NODs信号通路来缓解免疫应激提供重要理论依据。

本项目探讨了NODs信号通路在仔猪免疫应激中的作用及其营养调控。（1）采用脂多糖（LPS）刺激仔猪建立免疫应激模型，研究免疫应激对NODs信号通路关键基因（NOD1、NOD2、RIP2、NF-κB和TNFα等）在仔猪肠道、免疫系统、神经内分泌系统、肝脏、肌肉和脂肪组织的分布和基因表达水平的影响。结果表明：这些基因在仔猪免疫组织表达量较高，在皮下脂肪和肠道表达量居中，在其他组织中表达量相对较低。免疫应激增强了这些基因在各组织中的表达。这表明NODs信号通路可能参与仔猪免疫应激的调控。在此基础上，通过NODs抑制剂Nodinitib-1抑制猪巨噬细胞NODs的活性，研究抑制NODs活性对免疫应激反应的影响。结果表明：Nodinitib-1可缓解LPS诱导的猪巨噬细胞NODs信号通路相关基因的表达，缓解了免疫应激反应。这表明NODs信号通路激活可启动猪的免疫应激，负调控NODs信号通路成为控制免疫应激的新途径。（2）探讨营养素，包括n-3多饱和脂肪酸（PUFA）、天冬氨酸（Asp）和天冬酰胺（Asn）是否可通过负调控NODs信号通路，从而缓解仔猪免疫应激。结果表明：①鱼油（富含n-3PUFA）可通过抑制下丘脑-垂体-肾上腺-免疫轴、肝脏、肠道和肌肉中NODs信号通路关键基因的表达，从而抑制LPS导致的下丘脑-垂体-肾上腺-免疫轴的激活、肝脏、肠道和肌肉的炎症反应，最终缓解了仔猪应激反应。②ASP可通过抑制NODs信号通路，降低肠道炎症反应，从而缓解LPS导致的仔猪肠道结构和功能的损伤。③在LPS刺激早期和晚期，Asn对NODs信号通路相关基因的mRNA表达、炎性介质的产生发挥相反的调控作用，并改善了肝脏功能。