B淋巴细胞在恶性胸腔积液发生机制中的作用

A substantial numbers of B lymphocytes are present in malignant pleural effusion (MPE), however, the immunological characteristics of these B cells are unclear. The current study will extend our previous works and 1) will elucidate the phenotypic characteristics and distribution of subgroups of B cells in MPE; 2) will explore the proliferation and function of B ells in MPE; 3) will explore antibody and cytokine production by B cells, to the involvement of STAT signal pathway in the process of antibody and cytokine production; 4) will investigate the effects and mechanism of B cells on MPE formation in vivo; 5) will elucidate the the effects and mechanism of B cells on generation and differentiation of Th1, Th17, Th9, and Th22 cells in murine model of MPE; 6) To investigate the clinical values of total B cells and subgroups of B cells, as well as their soluble mediators of evaluating prognosis and differential diagnosis of MPE. The accomplishment of this work will elucidate the roles of B cells in the pathogenesis of MPE, improve differential diagnosis and prognostic evaluation of MPE, and further to identify targeting molecules for treating patients with advanced malignancies.

恶性胸腔积液（MPE）中有较大量的B细胞存在，目前人们对这些B细胞的免疫学特征知之甚少。本项目将在我们以前工作的基础上，① 探讨MPE中B细胞的表型特征和亚群分布；② 探讨初始和记忆B细胞的增殖反应和功能状态；③ 探讨B细胞分泌的抗体和细胞因子，并探讨STAT信号通路在分泌过程的作用；④ 以成熟B细胞缺失小鼠制备MPE模型，探讨B细胞对MPE形成的影响及其机制；⑤ 探讨B细胞对MPE小鼠Th1、Th17、Th9、Th22细胞发生和分化的影响及其机制。⑥ 探讨MPE中的B细胞及其亚群，以及相关的可溶性介质对于鉴别诊断良恶性胸腔积液的临床价值，并探讨这些免疫学指标在评估MPE患者病情和预后中的价值。本项目的完成一方面将加深人们对B细胞免疫学的认识，另一方面也加深对MPE发生机制的认识。同时，将提高MPE临床评估和鉴别诊断的效率，并为治疗晚期恶性肿瘤筛选靶标分子提供理论依据。

既往淋巴细胞在恶性胸腔积液（MPE）中的研究多集中在T细胞领域，MPE中存在大量B细胞，但人们对这些B细胞的特征和功能了解不多。本课题在我们以前研究工作的基础上，阐述MPE环境中B细胞的免疫学特征，各种亚型B细胞的数量及百分比的分布规律，各种亚型B细胞表面表达的特征分子，B细胞对MPE个体胸水量及总生存的影响，B细胞对各亚群Th细胞比例的影响及分化规律的影响，探讨这些影响可能涉及的信号通路。我们发现：与外周血和脾脏相比，在野生型小鼠MPE中，总B细胞降低而活化的初始B细胞的百分比增加，活化的初始B细胞高表达CD80，CD86，MHC-II，CD44，CD69，PD-L1等分子。与野生型小鼠相比，B细胞缺失小鼠的MPE中TH1细胞减少，TH17细胞增多，同时胸水量减少，生存期延长。将活化的初始B细胞回输到B细胞缺失小鼠体内，可以增加MPE中的TH1细胞，降低TH17细胞，并缩短MPE小鼠的生存期。此外，本研究还发现活化的初始B细胞通过PD-1/PD-L1途径抑制TH17细胞的增殖，并通过分泌IL-27/IL-6促进初始CD4+T细胞分化为TH1/TH17细胞。综上所述，本研究揭示了初始B细胞通过调节TH1/TH17细胞反应促进MPE的形成，为癌症的治疗干预提供新的靶标。