利用特异性成分敲除技术辨识三脉菝葜抗肿瘤活性组分群

Smilax plants contain steroidal saponins in large numbers, the chemical structure of the type of rich. This genus is widely distributed, the wild resources reserves is big, have medicinal value and great development potential. A large number of reports showed that, steroidal saponins has anti-tumor activity, the effect is remarkable. The members of our research group conducted a systematic study on the chemical composition of Smilax trinervula, isolated more than 40 steroidal saponins, found some new compounds. Research group forecast Smilax trinervula natural have a set of components (constituent group), they make clear, content ratio explict, interactions in the body, displays the anti-tumor drug efficacy jointly. This project is based on the TCM theory, using modern scientific means and methods, using specific constitute knock-out strategy to identify the Constituent group with anti-tumor activity in Smilax trinervula, clarify dose effect relationship between the active components, reveal its anti tumor combined effects of material base, and provide new ideas for clinical treatment and drug research tumor.

菝葜属植物中含有大量的甾体皂苷类成分，化学结构类型丰富。该属植物分布广泛，野生资源蕴藏量大，具有较大的药用价值及开发潜力。大量文献报导表明，甾体皂苷具有抗肿瘤活性，效果显著。课题组成员前期针对三脉菝葜的化学成分进行了系统的研究，分离得到40多个甾体皂苷，发现了一些新型的化合物。课题组预测三脉菝葜中天然存在着一组成分（组分群），它们组成清楚、含量比例明确，交互作用于机体，联合发挥抗肿瘤药效。本项目以中医药理论为指导，采用现代科学手段和方法，利用特异性成分敲除技术辨识三脉菝葜的抗肿瘤活性组分群，明确活性成分组合间的量效关系，揭示其抗肿瘤的联合作用物质基础，同时为肿瘤的临床治疗和药物研究提供新思路。

1、利用体外细胞模型和小鼠体内移植瘤模型，对三脉菝葜抗肿瘤活性成分群进行了逐步敲除辨识，得到了抗肿瘤活性较好的组分，并对活性组分进行了化学成分分离纯化，得到了24个化合物。这些化合物主要为具有抗肿瘤作用的甾体皂苷类、含有二苯乙烯母核的芪类成分。对辨识菝葜属植物抗肿瘤活性成分研究具有一定的指导意义。.2、采用荷瘤小鼠模型研究了三脉菝葜活性组分、活性单一化学成分的抗肿瘤活性与作用机制，结果显示三脉菝葜活性组分醇提物、醇提物乙酸乙酯部位、活性成分薯蓣皂苷均对小鼠移植瘤均具有明显的抑制作用；作用机制研究显示，活性组分醇提物和活性成分薯蓣皂苷均能上调肿瘤组织中caspase 3、Bax的表达，但是活性组分醇提物乙酸乙酯部位高剂量却下调了肿瘤组织中caspase 3、Bax的表达，这与其抗肿瘤活性不一致，值得进行深入研究。这对进一步研究三脉菝葜的抗肿瘤活性成分及作用机制奠定基础。.3、对初筛无抗肿瘤活性的组分水部位，再次进行了抗肿瘤活性成分群逐步敲除辨识，得到了具有抗肿瘤活性的组分，并对活性组分进行了化学成分分离纯化，得到了6个含氮化合物，包括罕见的4个多羟基吡嗪化合物2-(1', 2', 3', 4'-四羟基丁基)-6-(2'', 3'', 4''-三羟基丁基)-吡嗪；此外，尿苷为抗肿瘤药物氟尿苷的中间体。这丰富了菝葜属植物化学成分的结构类型，为后续研究奠定了基础，并对辨识菝葜属植物抗肿瘤活性成分具有一定的指导意义。.4、研究了三脉菝葜多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响，结果显示三脉菝葜多糖对免疫抑制小鼠具有免疫功能恢复作用，改善免疫功能低下小鼠的免疫器官脏器指数、提升免疫抑制小鼠的体液免疫功能，对三脉菝葜发挥抗肿瘤活性有促进作用。