基于SP/NK-1R通路探讨推拿按揉法抑制腰椎间盘突出症大鼠脊髓背角中枢敏化的作用机制

Lumbar disc herniation(LDH) is one of clinical common lumbar disorders,Chinese Tuina of analgesia in lumbar disc herniation has better clinical effect, but the analgesia mechanism is unclear.Studies have shown that central sensitization is the main mechanism of pain in LDH and maintain and SP/NK 1 r pathways can strengthen the spinal dorsal horn of the central sensitization effect.Our previous study,Tuina intervention LDH has better clinical analgesic effect, and can significantly reduce the SP level of LDH model rat dorsal root ganglion.On this basis, we speculate"Tuina of LDH analgesia mechanism may be through the SP/NK1R pathway inhibition of spinal cord dorsal horn central sensitization".This topic proposed multidisciplinary approach,such as pain behavior,western blot and in vivo electrophysiology,observe the Anrou method of Tuina of LDH in the rat spinal cord dorsal horn SP/NK1R signaling pathways, and study with method of the dorsal horn of spinal cord adjustment of synaptic transmission efficiency (LTP).To confirm the Anrou method of Tuina the analgesic mechanism of lumbar disc prolapse is through the inhibition of SP/NK1R channel reduces the rat spinal cord dorsal horn central sensitization effect. This study reveals the analgesic mechanism of Tuina ntervention in lumbar disc herniation, to Tuina in the treatment of lumbar disc herniation clinical application experimental study foundation.

腰椎盘突出症（LDH）是临床上常见的腰部疾患之一，推拿有很好的镇痛效果，但目前镇痛机制尚不明确。研究表明，中枢敏化是LDH疼痛发生和维持的主要机制，而SP/NK-1R通路能够强化脊髓背角中枢敏化作用。我们前期研究表明，推拿干预LDH有很好的临床疗效，并且明显降低LDH模型大鼠背根神经节SP水平。据此，我们推测“推拿对LDH镇痛机制可能是通过SP/NK-1R通路抑制脊髓背角中枢敏化”。本课题拟采用疼痛行为学、蛋白免疫印迹及在体电生理等多学科方法，观察推拿按揉法对LDH大鼠脊髓背角SP/NK-1R信号通路的影响，并且研究按揉法对脊髓背角突触传递效能（LTP）的调控作用，从而证实推拿按揉法对腰椎间盘突出症的镇痛机制是通过调控SP/NK-1R通路信号，抑制大鼠脊髓背角中枢敏化作用。本研究在脊髓背角层面上揭示了推拿干预腰椎间盘突出症的镇痛机制，为推拿治疗腰椎间盘突出症的临床推广应用奠定实验研究基础。

腰椎间盘突出症（Lumbar Disc Herniation，LDH）是临床上常见的腰部疾患之一，常给患者带来很大的痛苦。推拿干预腰椎间盘突出症有很好的镇痛效果，但目前镇痛机制尚不明确，制约了推拿学科的进一步发展。因此，研究和揭示中医推拿对腰椎间盘突出症的作用机制，发现其镇痛的关键靶点是较为重要的问题。腰椎间盘突出症因神经受损引发疼痛，这种疼痛本质上属于神经病理性疼痛。中枢敏化是腰椎间盘突出症疼痛发生和维持的主要机制。研究发现，突触可塑性在疼痛的中枢敏化过程中发挥着重要作用，突触传递效能长时程增强（long term potentiation，LTP）是突触可塑性的主要表现形式，脊髓背角的LTP变化参与了慢性疼痛的调控机制，而SP/NK-1R通路能够强化脊髓背角中枢敏化作用。本课题建立腰椎间盘突出症大鼠模型，采用疼痛行为学、蛋白免疫印迹及在体电生理等多学科方法，观察推拿按揉法对LDH大鼠脊髓背角SP/NK-1R信号通路的影响，并且研究按揉法对脊髓背角突触传递效能（LTP）的调控作用。结果显示：（1）LDH大鼠造模侧机械痛觉、热痛觉过敏，而推拿按揉法干预能够降低大鼠的机械痛觉及热痛觉过敏，具有较好的镇痛作用，并且手法的镇痛效果需要时间的积累才有显著差异。（2）推拿按揉法能改善LDH大鼠造模侧的最大接触面积、足印面积、摆动速度及摆动时间等步态参数。（3）推拿按揉法能够延缓LDH大鼠的腓肠肌细胞的萎缩，但对腓肠肌湿重并无显著影响。（4）推拿按揉法能够抑制LDH大鼠背根神经节SP、P2X3受体的表达，以及抑制LDH大鼠脊髓背角NK1R及NR2B的表达。（5）LDH大鼠模型脊髓背角出现C波波峰显著增大趋势，场电位明显增强；推拿按揉法能够显著降低强直刺激后C波波峰幅度，有效抑制LDH大鼠脊髓背角突触传递效能（LTP），起到镇痛的效应。以上结果，从多个层面系统地说明推拿按揉法对于腰椎间盘突出症的作用机制，为临床应用奠定实验基础。