慢性前列腺炎(CP/CPPS)中TRPM8触发并维持神经源性炎症的机理研究

慢性前列腺炎（CP/CPPS）、神经源性炎症（NI）与自身免疫反应三者之间的关系尚未阐明。基于TRPM8分子抗原性较强，并主要表达于脊髓背根神经节（DRG）和前列腺组织，本课题提出"TRPM8是触发与维持神经源性炎症进而导致CP/CPPS发病的自身免疫因子"假说，核心思想为：免疫细胞首先与前列腺TRPM8抗原诱发接触,经体循环到达DRG后与DRG中TRPM8激发接触，导致细胞因子释放，活化DRG神经元，触发DRG支配区域的NI；NI使更多的免疫细胞被激活并活化DRG神经元，从而维持并加重NI，最终导致CP/CPPS。本课题拟利用RNA干涉技术抑制靶细胞TRPM8基因表达，通过比较：1.TRPM8敏感性不同的T淋巴细胞对相同DRG组织的作用；2.相同致敏T淋巴细胞对不同的TRPM8抗原表型DRG神经元的作用，验证我们的假说。本研究有可能进一步揭示CP/CPPS的发病本质并发现新的诊治靶点。

背景：慢性前列腺炎/慢性盆底疼痛综合征（chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndromes，CP/CPPS）是泌尿男科门诊中就诊率最高的疾病之一。国内外的大量文献报道和我们的前期研究结果都表明： CP/CPPS的发病与前列腺组织的自身免疫状态失衡密切相关，脊髓背根神经节（DRG）神经元异常变化导致的神经源性炎症（neurogenic inflammation，NI）可能参与了CP/CPPS的发病过程。假说：基于在前列腺中高表达的TRPM8分子抗原性较强，并主要表达于DRG和前列腺组织，本课题提出“TRPM8是触发与维持神经源性炎症进而导致CP/CPPS发病的自身免疫因子”假说，核心思想为：免疫细胞首先与前列腺TRPM8抗原诱发接触,经体循环到达DRG后与DRG中TRPM8激发接触，导致细胞因子释放，活化DRG神经元，触发DRG支配区域的NI；NI使更多的免疫细胞被激活并活化DRG神经元，从而维持并加重NI，最终导致CP/CPPS。方法：本课题从两个方面进行研究：1.观察应用TRPM8免疫方法制作CP/CPPS动物模型的效果；我们分别应用动物的前列腺匀浆与TRPM8纯化蛋白制剂免疫动物，观察病理表现，判断造模效果。2.观察模型动物中致敏T淋巴细胞对DRG神经元的作用，以验证我们的假说。结果：实验数据表明：TRPM8不仅能够成功制作出CP/CPPS的动物模型，而且效率更高，效果更加明显，说明TRPM8具有良好的免疫原性。继而，在制作成功动物模型后，我们将动物模型脾脏中的T淋巴细胞与原代培养的DRG细胞共孵育，发现其上清液中TNF-α及SP水平明显增高，说明：致敏后T淋巴细胞可以刺激DRG细胞发生炎性反应，进一步证明我们的假说是成立的。结论：我们的研究证实自身免疫因子TRPM8能够触发与维持神经源性炎症进而导致CP/CPPS发病，本研究提出了一种全新的CP/CPPS发病机制。