核仁素对LPS所致炎症介质基因表达的调控及其机制研究

核仁素是一个具有多种生物学功能的RNA 结合蛋白，但其在LPS所致炎症反应中的生物学意义尚不清楚。申请者在首次发现核仁素具有促炎作用的基础上，通过对炎症介质基因的mRNA 序列进行分析，发现多个基因的mRNA中含有完整的核仁素结合元件，推测核仁素可能通过与核仁素结合元件相结合而影响炎症介质mRNA分子的稳定性,从而调节炎症介质的表达。本项目拟在此基础上，深入探讨核仁素在LPS所致炎症反应中的表达模式，并采用RNA凝胶滞留实验、紫外交联、蛋白质-RNA 免疫共沉淀及mRNA 稳定性分析等技术筛选受核仁素调控的炎症介质基因，探讨核仁素对LPS 诱导的炎症介质基因表达的调控机制。开展本项目研究，可望揭示核仁素在LPS 所致炎症介质表达中的调控作用及其机制，为脓毒症等炎症相关疾病的防治提供新的线索。

本项目主要对核仁素在内毒素血症中的时空表达特性、对炎症相关基因的影响及其调控机制进行了深入探讨，主要发现如下：.1. 首次发现核仁素在内毒素血症小鼠肺组织中表达上调; 2. 首次发现核仁素在LPS刺激的RAW264.7小鼠巨噬细胞中表达上调; 3. 首次发现核仁素对LPS所致IL-1β表达和释放具有促进作用；4. 首次发现核仁素对炎症反应中IL-6表达和释放具有调控作用；5. 首次发现核仁素对LPS所致TNF-α表达和释放具有促进作用；6. 首次发现核仁素与炎症保护基因Hsp70 mRNA具有直接相互作用；7. 首次发现核仁素与炎症保护基因Hsp32 mRNA的直接相互作用及核仁素对Hsp32 mRNA 的3’UTR的调控作用；8. 首次细胞膜表面核仁素对内毒素所致THP-1细胞MAPK信号通路及NF-κB信号通路活化中具有调控作用。