靶向性纳米颗粒携带p28GANK siRNA治疗肝细胞癌的实验研究

p28GANK是肝细胞癌内高表达的癌蛋白，在肝癌细胞的增殖、凋亡、成瘤及侵袭转移过程中均发挥着重要作用。我们前期研究发现下调p28GANK表达可明显抑制肝癌细胞生长，诱导细胞凋亡，首次提出p28GANK是肝癌靶向治疗的新靶点。但如何将靶向p28GANK的siRNA安全有效地输送至肝脏肿瘤目前仍是难题。本课题拟通过使用靶向肝脏肿瘤的纳米颗粒包裹针对p28GANK的siRNA，结合细胞学实验和裸鼠原位肝癌模型，进一步明确下调p28GANK表达对肝癌细胞体内外生长、凋亡和侵袭转移的影响，确定靶向性纳米颗粒携带p28GANK siRNA在肝癌靶向治疗中的效应和价值。预期研究结果不但将加深我们对p28GANK在肝癌中致病机制的认识，还可建立一种系统性给予siRNA的靶向治疗实验模型，为以p28GANK为靶点的转化医学研究实质性地推向临床奠定理论基础。

肝癌发生一个是慢性的多因素、多步骤的复杂过程。Gankyrin是最早发现在肝癌中特异性高表达的癌基因，近几年的研究显示gankyrin在肿瘤相关的信号转导中具有非常重要的调控作用。本研究旨在通过在肝脏特异性过表达癌蛋白gankyrin的转基因小鼠基础上构建经由慢性肝纤维化、肝硬化到肝癌的动物模型，研究gankyrin在这一恶性进展过程中的作用及机制，并通过制备肝脏靶向性纳米颗粒，明确gankyrin在肝癌靶向治疗中的应用价值。通过研究我们发现DEN/CCl4诱导肝癌形成过程中ankyrinhep组的肿瘤数目和肿瘤大小均明显高于野生对照组；CCl4单独处理16周后在gankyrinhep组有50%小鼠形成肿瘤，而在野生组未发生；CCl4处理的gankyrinhep组肝细胞坏死和凋亡较野生对照加重，这与gankyrinhep组呈现Rac1/JNK通路相对野生对照组持续增强活化密切相关。以靶向性纳米颗粒下调gankyrin的表达后，gankyrinhep组肝纤维化和肝癌的发生均受到明显抑制。