ARB抑制miR-193a表达促进早期糖尿病肾病壁层上皮细胞-足细胞转分化研究

Podocyte injury is a central pathomechanism to diabetic nephropathy. Podocyte, specialized terminally differentiated cells, is difficult to regenerate. We observed that parietal epithelial cell(PEC) has the potential ability to repair podocyte in In our previous study, ARB can promote the PEC-podocyte transition. But the mechanism remains to be further explored. The new report found that miR-193a expression downregulation can induce high expression of PEC WT-1 then promote the transition to podocyte. Therefore, we put forward the hypothesis: ARB promote Parietal epithelial cell-podocyte transition by downregulating microRNA-193a expression in Diabetic nephropathy. In this study, based on db/db mice and podocyte PEC in vivo, podocyte markers WT-1, synaptopodin, GLEEP1and PEC markers claudin1, CD44 and miR-193a expression were observed, with real timePCR, Western blot, cell transfection, we investigated whether miR-193a play a role in PEC-podocyte transition in early diabetic nephropathy, with miR-193a as a new viewpoint to provide new ideas for delaying the progression of diabetic nephropathy.

足细胞损伤导致糖尿病肾病大量蛋白尿，而足细胞是终极分化细胞，一旦损伤很难再生，我们前期研究中观察到壁层上皮细胞(PEC)可转分化修复足细胞，ARB可促进转分化过程，但作用机制还有待于进一步探讨。最新研究发现miR-193a表达被下调后可诱导PEC高表达WT-1，促进其向足细胞转分化。为此我们提出假说：糖尿病肾病时ARB抑制PEC表达miR-193a诱导PEC向足细胞转分化。本研究拟以自发性2型糖尿病db/db鼠及体外培养足细胞、PEC为研究对象，以足细胞标志物WT-1、synaptopodin、GLEEP1和PEC标志物claudin1、CD44以及miR-193a的表达为观察指标，采用real timePCR、western blot、细胞转染等手段，观察miR-193a在早期糖尿病肾病PEC转分化对足细胞的修复过程中发挥的作用，以miR-193a为新视点为延缓糖尿病肾病进展提供新思路。

足细胞的损伤是导致糖尿病肾病（DN）蛋白尿产生的主要原因，足细胞是终极分化细胞，一旦损伤很难再生，而肾小球壁层上皮细胞（PEC）具有潜在的增殖能力，有学者提出PEC具有转分化成足细胞的可能，进而修复受损的足细胞。我们前期研究中观察到PEC可转分化修复足细胞，氯沙坦可促进转分化过程，但作用机制还有待于进一步探讨。最新研究发现miR-193a表达被下调后可诱导PEC高表达WT-1，促进其向足细胞转分化。本研究拟以2型糖尿病db/db鼠为研究对象，以足细胞标志物WT-1、synaptopodin和PECs标志物claudin1、pax-2以及miR-193a 的表达为观察指标，来观察miR-193a在早期糖尿病肾病小鼠足细胞损伤修复过程中发挥的作用。研究发现给予db/db小鼠ARB治疗后可降低蛋白尿、血清肌酐，改善肾功能，说明ARB具有保护肾脏的功能。ARB治疗组小鼠足细胞标志物较未用药组明显增多。说明ARB可保护受损的足细胞，维持足细胞数目，延缓肾小球硬化发展。给予ARB治疗后，db/db-ARB小鼠miR-193a的表达量较db/db小鼠明显下降，提示ARB可能抑制了miR-193a的表达，从而促进早期糖尿病肾病小鼠足细胞损伤修复，进而保护受损的足细胞，延缓糖尿病肾病的发展。除了按照基金的原定计划进行的工作以外，我们还基于目前关于足细胞损伤修复的最新研究动态中APOL-1-miR-193a-WT-1在其中发挥重要的机制，收集了正常人和糖尿病肾病患者的临床资料及肾组织检测糖尿病肾病患者APOL-1表达减少，miR-193a表达增加，WT-1表达减少，我们推测糖尿病肾病状态下APOL1基因低表达，可能引起足细胞高表达miR-193a，造成WT-1下调引起足细胞损伤，.科学意义：该项目发现ARB可保护受损的足细胞，维持足细胞数目，延缓肾小球硬化发展，并首次提出ARB可能抑制了miR-193a的表达，从而促进早期糖尿病肾病小鼠足细胞损伤修复，进而保护受损的足细胞，以miR-193a为新视点为延缓糖尿病肾病进展提供新的思路，而且APOL-1-miR-193a-WT-1可能在足细胞损伤修复过程中发挥重要的作用。