RNA聚合酶II第五亚基调节蛋白RMP对肝癌起始细胞的调节功能及机制

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the sixth most common cancer and the third leading cause of cancer-related mortality worldwide.Tumor-Initiating Cells (T-ICs) are relatively to metastases, recurrence and resistant chemotherapy due to their capacity of self-renewal and differentiating. Targeting T-ICs in HCC is one of therapeutic approach. Therefore, a most critical issue is to search for molecular targets related to T-ICs, which will provide new way for intervention of metastatic recurrence of HCC. RPB5-mediating protein (RMP) is associated with the RNA polymerase II subunit RPB5.RMP was required to maintain genome stability by playing an important function in controlling cell cycle and apoptosis. Overexpression of RMP enhenced the proliferation and growth of HCC cells. Therefore, RMP may play a complex role in hepatocarcinogenesis and progression, which was yet to be elucidated.In our preliminary study,we found RMP high expressed in HCC samples and its protein leves correlated with prognosis of HCC patients. Our data also showed that RMP was preferentially expressed in liver T-ICs and played an important part in maintaining stem cell population by enhancing the self-renewal capacity, tumorigenicity and metastasis potential.

肿瘤起始细胞（Tumor-Initiating Cells）是在肿瘤形成过程中一类具有自我更新和分化潜能的细胞，与肿瘤的发生和转移密切相关。RMP是RNA聚合酶II第5亚基的调节蛋白。研究发现RMP在细胞凋亡、基因组稳定以及肿瘤放化疗抵抗中均具有调节作用，但是RMP在肝癌发生及进展中是否发挥重要作用至今不明。我们的实验结果提示，RMP在人肝癌组织样品中表达水平明显升高，RMP高表达可以显著提升肝癌细胞中高自我更新能力细胞群的比例。并且我们发现RMP对IL6-STAT3信号通路具有很显著的调节作用。这些结果均强烈提示RMP在肝癌起始细胞功能调节中可能具有非常重要作用。因此，本课题将大样本检测RMP在肝癌组织中表达，探讨其与临床资料相关性和预后的关系，并深入研究RMP对肝癌起始细胞功能调节的分子机制。本项目也计划使用RMP基因敲除小鼠进行诱癌实验，体内证实RMP对肝癌发生和进展的重要作用。

RMP 在人类肝癌组织样品中表达水平明显升高，并且RMP在具有自我更新能力的spheroid 细胞中表达水平明显高于贴壁生长的肝癌细胞。这些结果均提示RMP 可能在肝癌的起始细胞/肝癌干细胞中发挥着重要作用。在本研究中，我们将首先检测肝细胞癌细胞系中和临床样本中RMP 的表达情况，分析其表达变化与患者临床病理资料关系。利用慢病毒感染系统稳定干扰RMP 的细胞系，进一步观察RMP 对肝癌细胞自我更新能力及转移的影响。同时阐明RMP 调节肝癌细胞转移的具体分子机制。本实验首先在临床样本中发现RMP 的表达与门静脉癌栓关系密切。在细胞水平发现RMP 蛋白能够促进肝癌细胞的转移和自我更新能力。进一步探索发现RMP 促进肝癌细胞的转移是通过影响肝癌细胞自身分泌的IL-6，从而影响IL-6/STAT3 信号通路。具体影响IL-6 表达的分子机制是，RMP 可以促进p65结合至IL-6 的启动子区，促进IL-6 的转录水平。我们前期的实验结果显示，RMP 与肝癌细胞的转移密切相关，这提示RMP高表达的肝癌细胞可能具备较高的转移能力。因此我们推测RMP 可能作为肝癌患者判断预后的标志及评估肝癌术后TACE 疗效的标志。研究发现RMP 在肝癌组织中表达升高，其表达与肝癌患者性别，肿瘤大小，门静脉癌栓侵犯，BCLC 分期、TNM 分期和术后生存期相关。高表达RMP患者术后生存期更短。但在高表达RMP 的患者中，术后的TACE 可以明显的提高患者的总体生存期；而低表达RMP 的患者整体生存情况较好，术后的TACE并不能提高患者的总体生存时间。这为肝癌患者术后是否需要行TACE 预防肿瘤复发提供了可靠的分子标志物。