siRNA-HIF-1α对马桑内酯点燃SD大鼠颞叶癫痫耐药模型耐药的影响

我们前期工作已成功建立了马桑内酯点燃SD大鼠颞叶癫痫耐药模型，其大脑微血管内皮细胞、星型胶质细胞和神经元的多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因（MRP1）表达明显高于对照组。本工作组近期在该模型海马区相应细胞发现低氧诱导因子(HIF-1α)过度表达，与李杏色等人研究结果一致。肿瘤研究证实HIF-1α能调控MDR1、MRP1的表达，抑制HIF-1α表达能干扰肿瘤耐药性。迄今未见癫痫模型中HIF-1α与MDR1、MRP1关系的报道。本研究以马桑内酯点燃SD大鼠颞叶癫痫耐药模型为研究对象，应用腺病毒载体介导的RNAi技术，从细胞及机体水平探究难治性癫痫中HIF-1α与MDR1、MRP1的关系，探讨难治性癫痫耐药机制；从行为学、脑电图、基因、蛋白水平，多角度评价siRNA-HIF-1a通过沉默模型海马HIF-1α的表达而对难治性癫痫耐药性的影响，为难治性癫痫的治疗开辟新途径。

难治性癫痫是神经科学领域研究的难点，其发病机制并不完全清楚。肿瘤研究已发现抑制低氧诱导因子（HIF-1α）的过度表达能调控多药耐药基因（MDR1）及其蛋白产物Pgp的表达，从而干扰肿瘤耐药性，证实HIF-1a可能参与肿瘤耐药。本课题我们成功建立了马桑内酯点燃的SD大鼠颞叶癫痫耐药模型，在模型点燃过程中，多时点均发现其海马、颞叶皮质的HIF-1α和MDR1在基因和蛋白水平均较其他脑区表达增高。据RNA干扰（RNAi）序列设计原则，我们构建了靶向大鼠HIF-1α基因的RNAi重组慢病毒，再通过侧脑室注射的方法感染耐药癫痫大鼠模型，在体证实了沉默HIF-1α表达能够逆转耐药癫痫模型的海马、颞叶Pgp过度表达，从而在一定程度上逆转了难治性癫痫的耐药性，为难治性癫痫的治疗开辟了新途径。除了动物实验外，我们还在难治性颞叶癫痫患者术后海马标本中发现HIF-1α及MDR1较正常对照人的海马过度表达，与马桑内酯点燃的大鼠颞叶癫痫耐药模型海马中上述指标表达趋势一致，进一步说明HIF-1α在难治性癫痫耐药机制中起重要作用。本课题已发表SCI论文6篇，中文期刊论文2篇，另撰写2篇SCI论文正在投稿及审稿中；已经获得国际抗癫痫联盟等奖学金参加国内外主流学术会议并作大会发言3次及壁报交流2次；以本课题成果为核心获得2012年四川省科技进步三等奖；本课题培养博士、硕士研究生各2名。