艾灸诱导HSP-PCs产生并回输体内对荷瘤大鼠肿瘤细胞抑制效应的研究

As finding out tumor-specific antigens to be an important goal in tumor therapy, HSP-PC provide a secure source. Using which method could increase the expression of HSPs in tumor cells is a key issue in the field. The project replicate gastric neoplasm model by transplanting method, then induce tumor cell’s expression of HSP－PC by moxibustion. Purify and extract HSP-PC from the gastric carcinoma then transfuse back into similar tumor-bearing rats. Use inhibition rate of tumor cell, tumor tissue histomorphology, cell apoptosis and other indexes to investigate the inhibitory effects of moxibustion and HSP-PC on tumor cells. Using peripheral T lymphocytes and their subtypes, cytotoxic T lymphocyte and their associated antigen 4, cytokine, protein expression of costimulatory molecules B7 family and etc. reveal the important effects of above indexes on immune response process to tumor cells. Compared differences of tumor inhibitory effects in moxibustion, HSP-PC transfusion and the combined therapy, establish the experimental bases for the development of moxibution-(HSP-PCs)-tumor vaccines.

寻找肿瘤特异抗原是肿瘤治疗中的一个重要目标, HSP-PC的发现为肿瘤特异抗原提供了安全的来源, 具有广泛及潜在应用价值。采用什么方法能提高肿瘤细胞内HSPs表达是该领域的一个关键问题。本项目以移植法复制胃癌模型作为载体，以艾灸诱导肿瘤细胞表达HSP－PC，从艾灸后的胃癌大鼠的肿瘤组织中纯化并提取HSP－PC，回输到同类荷瘤大鼠体内，以肿瘤细胞抑制率、肿瘤组织形态学及细胞凋亡等为指标探讨艾灸及HSP－PC对肿瘤细胞的抑制效应。以外周T淋巴细胞及其亚型、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4、细胞因子、共刺激分子B7家族的蛋白表达等为指标揭示上述施加因素对肿瘤细胞免疫应答反应过程的影响。比较艾灸、HSP－PC回输及两者合并治疗对肿瘤抑制效应的差异，为艾灸－（HSP-PCs）-肿瘤疫苗的开发奠定实验基础。

胃癌是威胁人类健康的重要疾病，其发生发展与机体免疫功能密切相关。热休克蛋白70作为一种热应激蛋白，在肿瘤免疫过程中发挥了类似免疫佐剂的重要作用。既往研究表明艾灸能较好地增强机体的免疫功能，本项目以胃部癌组织移植术制备胃癌大鼠模型，观察了艾灸对胃癌大鼠肿瘤生长及免疫功能的影响。研究结果表明艾灸能有效抑制胃癌大鼠瘤体的增长与转移，通过增加胸腺脾脏指数、调节T细胞亚群、纠正Th1、Th2细胞因子失衡提高了肿瘤免疫功能。进一步采用抗体柱亲和纯化法提取艾灸后胃癌大鼠胃癌组织内HSP70-PC，通过体外细胞及体内动物实验观察了该HSP70-PC的免疫调节与肿瘤抑制作用。结果表明，艾灸能明显增加胃癌组织内HSP70-PC的表达量，艾灸后胃癌组织来源的HSP70-PC提取物在体外能有效促进树突状细胞、T细胞增殖并抑制Walker256癌细胞，作为“疫苗”回输同类荷瘤大鼠后仍具有肿瘤抑制及免疫调节作用。本项目研究结果为艾灸在肿瘤治疗中的运用提供了实验依据，为更好地开发HSP70肿瘤疫苗提供了新参考。