槐糖脂的酶法改造与代谢工程菌构建及生物活性研究

申请者实验室筛选到的槐糖脂拟威克酵母变种产生的槐糖脂产量可达100g/L。实验室前期的工作表明，这株酵母菌能够产生内酯型和酸型槐糖脂，其中一种内酯型槐糖脂能够诱导人肝癌细胞系H7402和人肺腺癌细胞系A549的细胞凋亡，产生的酸型槐糖脂，对于皮肤癣菌有良好的抑制作用。本课题拟将外源的鼠李糖脂产生菌铜绿假单胞菌的鼠李糖脂产生过程中的关键酶基因，即鼠李糖基转移酶的基因簇rhl AB转移到槐糖脂产生菌拟威克酵母变种中，并使其高效表达。利用工程菌发酵生产获得一系列具有杂合糖基的糖脂型生物表面活性剂。同时对原拟威克酵母产生的槐糖脂利用脂肪酶法进行结构修饰。对鉴定得到的具有杂合糖基的糖脂型生物表面活性剂和原槐糖脂衍生物进行表面活性测定，并对其抗菌和抗肿瘤活性进行研究，分析槐糖脂结构上的变化对其生物活性的影响，为进一步用于制备高效低毒、不易产生耐药性的低成本新药提供理论和实践指导。