利用免疫蛋白组SPRi芯片技术筛选阿尔茨海默症的类肽诊断探针

The world’s population is ageing and Alzheimer’s disease (AD) has been one of the killers threatening human being. Thus,a practical clinical diagnostic agent is demanded urgently. Traditional diagnostic probe development is always based on some special protein targets, bringing lots of work on protein purification and identification, and the results are still far from the clinical application.Here, we adopt a novel strategy "double-blind screen", where the screen job could face clinic serum directly instead of biomarkers and get more believable probes close to clinic.Peptoid chemicals show their potential as ideal candidates owing to various structure, stable property and high affinity to protein. Here, we plan to screen diagnostic probes for Alzheimer’s disease via peptoid combinatorial library by Surface Plasmon Resonance Imaging technology and finally get a potential peptoid diagnostic agent for Alzheimer’s disease.

随着全球老龄化的加剧，阿尔茨海默症已成为影响人类健康的重大疾患，临床上迫切需要可靠的诊断试剂。传统的诊断探针的筛选主要针对某一个或几个特定的靶点，带来了大量繁琐的蛋白纯化与鉴定工作，同时筛选得到的分子探针与临床应用还有很大距离。本课题拟采用蛋白质组研究新策略“双盲法”，选择临床血清作为试验对象，筛选直接能应用于临床的疾病特异性诊断探针。待筛文库的构成上，我们选择构型多样、结构稳定、合成简便、蛋白亲和性特异的类肽化合物；在表征方法上，选择免标记、实时监控、微量分析的表面等离子体共振成像技术。本项目研究将筛选得到高特异性识别阿尔茨海默症患者血清的类肽作为诊断探针，为阿尔茨海默症的临床诊断提供新型的高特异性、高灵敏度的血清诊断试剂。

阿尔茨海默症（Alzheimer’s Disease，简称AD）是一种进行性发展的致死性神经退行性疾病，病程缓慢且不可逆转。虽然AD病程不可逆转，但是如果能够在发病初期及时诊断并进行相应的干预治疗，可以大大缓解病情，延迟病程的发展。因此临床迫切需要特异性强、灵敏度高的AD早期诊断试剂。.本项目选用结构丰富、合成简单、蛋白亲和力高且生物环境下性质稳定的类肽作为目标，利用免标记、实时监控、微量分析的表面等离子体共振成像（Surface Plasmon Resonance Imaging，SPRi）技术进行阿尔茨海默症临床早期诊断试剂的筛选。通过芯片表面三维修饰设计和重生条件优化，实现了芯片的多次重复使用；通过多肽-抗体、多肽-蛋白、蛋白-抗体、多肽-抗血清等多个层面对SPRi筛选条件进行考察，结果表明该方法稳定、筛选结果特异性强；通过合成条件的优化，结构单元侧链的设计，实现了组合文库的构建；基于该文库，直接使用临床血样“双盲法”进行筛选，得到1种可用于临床诊断AD的类肽探针；进一步的研究发现该探针与Aβ42具有高亲和力，是其可以诊断AD的主要原因。目前本项目已完成数十例阿尔茨海默症临床血清样本的筛查，结果有效、可重复，与临床诊断结果吻合。