内皮祖细胞动员及其阻止动脉瘤栓塞后复发的作用机制研究

动脉瘤栓塞后复发是血管神经外科的常见问题，其发生除了操作技术层面的原因外，可能与患者自身血管修复机制的功能障碍有关。内皮祖细胞（EPC）被认为在全身血管修复中起到至关重要的作用。本课题提出外周血EPC参与修复栓塞后动脉瘤瘤颈内皮层的假设，证明动员EPC，从而提高其数量和功能是降低栓塞后动脉瘤复发的有效措施。研究分三部分：1、.颅内动脉瘤栓塞后复发与自身外周血中EPC数量与功能的关系研究；2、EPC参与栓塞后动脉瘤颈口内膜层修复的研究；3、自身EPC动员与防止动脉瘤栓塞后复发的基础应用研究。本课题将为降低颅内动脉瘤栓塞后复发率提供理论依据和解决方法，有望切实造福于大量患者。

研究背景：加快动脉瘤颈部位内皮层的形成是减少颅内宽颈及梭形动脉瘤栓塞治疗后复发的关键因素。.目的：证明<1>颅内动脉瘤栓塞后复发与患者外周血内皮祖细胞（EPC）数量及功能降低有关;<2>内皮祖细胞参与和促进栓塞后动脉瘤颈口内皮层的形成;<3>动员内源性EPC，加速和促进瘤颈再内皮化，从而降低动脉瘤的复发率。并采用内皮祖细胞移植和自身动员的方法检测其治疗的可行性。.方法：采用密度梯度离心方法提取单核细胞通过诱导培养出研究所需的两种 EPC。1、从人外周血中分离培养EPC；2、从大鼠骨髓中分离培养出EPC。外周血EPC来源于选择经GDC完全栓塞后随访5年稳定，5年内复发的囊状动脉瘤患者各20例（已排除因瘤颈大小导致复发的因素）。测定每例患者EPC的数量，检测其黏附、迁徙、增殖功能。比较两组间EPC在数量和功能上的差异。建立大鼠腹主动脉瘤模型并采用GDC进行完全栓塞。体外分离培养大鼠骨髓EPC（方法较人EPC培养方法作相应调整），并采用超顺磁性氧化铁纳米颗粒（SPIO)标记大鼠EPC。将EPC经动脉移植入模型体内；组织化学染色法观察移植后6周瘤颈口内皮层修复情况、动脉瘤再通率，追踪EPC在损伤部位参与内皮重建的情况。应用目前较为可行的细胞因子和氟伐他汀动员骨髓内EPC释放，检测血液中EPC含量、功能及对抑制动脉瘤再通的作用。.结果：通过密度梯度离心方法提取的单核细胞均可诱导培养出研究所需的两种EPC。通过对人外周血EPC数量和功能测定，我们发现颅内动脉瘤栓塞后复发与患者外周血EPC数量及功能降低有关。SPIO标记的大鼠骨髓EPC细胞活力（增殖、迁移、成管能力）较对照组无明显差异。通过动脉移植入模型体内， EPC－SPIO主要在瘤颈处聚集，促进栓塞后动脉瘤颈口新生内膜的形成并加速瘤颈的修复。细胞因子和他汀类药物有动员自身EPC作用。.结论：颅内动脉瘤栓塞后复发与患者外周血EPC数量及功能降低有关。EPC参与和促进栓塞后动脉瘤颈口内皮层的形成和瘤颈的修复。.成果：发表相关SCI论文2篇，投稿1篇；国际学术交流2次；培养博士生1名、硕士生2名。