二仙汤有效成分群间抗骨质疏松的关联性研究

二仙汤为临床上用来治疗妇女更年期综合征和骨质疏松症的有效方剂，在前期的研究工作中，我们已经获得了其中防治骨质疏松的有效成分群。在本课题中我们根据骨质疏松发生的病因病理学原理，以二仙汤中有效成分的活性特点为线索，研究二仙汤中各有效成分群及其组合物对骨形成和骨吸收的影响，探讨二仙汤中有效成分防治骨质疏松的作用靶点，观察有效成分群及其组合物对骨质疏松相关指标的作用和趋势特点，分析各有效成分群间的药效作用的相互影响，从整体动物、细胞、蛋白质和基因分子水平上阐释二仙汤有效成分群间防治骨质疏松作用的关联性，为中药复方多成分、多途径、多靶点作用的研究提供一定的思路。

中药复方是中医用药的主要形式，具有深刻的科学内涵和临床价值。研究中药复方多个有效成分间药效作用的关联性，能够较完整的揭示中药复方多成分通过多种途径作用于人体多个靶点发挥整合调节的机理，揭示中药有效成分群防治疾病的优越性。二仙汤为临床上用来治疗妇女更年期综合征和骨质疏松症的有效方剂，本项目以二仙汤中有效成分的活性特点为线索，研究二仙汤中各有效成分群及其组合物对骨形成和骨吸收的影响，探讨二仙汤有效成分防治骨质疏松的作用靶点和有效成分群间药效作用的相互作用关系。本项目研究结果表明二仙汤中促进骨形成的有效成分淫羊藿苷、知母皂苷BII和阿魏酸协同促进成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶活性和骨矿化结节的形成，促进骨基质蛋白骨钙素、骨桥蛋白和I型胶原的产生，知母皂苷B-Ⅱ及淫羊藿苷通过BMP信号通路调节成骨细胞的功能，淫羊藿苷和阿魏酸通过Wnt/β-catechine通路调节成骨细胞的功能。抑制骨吸收的有效成分淫羊藿苷、小檗碱和仙茅苷协同抑制破骨细胞的形成、抗酒石酸酸性磷酸酶活性和骨吸收作用，其机制与其增加成骨细胞产生的OPG和RANKL的比值，及抑制RANKL介导的破骨细胞MAPK通路Akt、ERK、JNK、p38和I-κB的磷酸化有关。以去卵巢诱导的骨质疏松小鼠为模型，进一步明确了二仙汤有效成分配伍后，在增强抗骨质疏松作用的同时，没有产生引起子宫增生的副作用。二仙汤镇痛和补血活血有效成分的研究结果表明巴戟天环烯醚萜苷类水晶兰苷为二仙汤中镇痛的有效成分，处分其他成分可能会增加水晶兰苷的作用，当归阿魏酸为二仙汤中补血和活血的有效成分。通过这些研究阐释了二仙汤有效成分群间防治骨质疏松的关联性，及多成分、多途径、多靶点调控骨代谢的机制，为新型的抗骨质疏松组分中药的研制奠定了依据。