血管内皮源性超极化因子与高血压性视网膜病变的相关性研究

血管内皮源性超极化因子(EDHF)是目前公认的由血管内皮细胞产生的三种舒张因子之一，主要在外周血管发挥调节舒张作用。关于EDHF的自然属性、信号传导通路等，目前尚无定论。在本项目的前期工作中，利用大鼠眼动脉，我们发现血管平滑肌细胞膜上的大电导的钙活化钾通道(BKCa)参与了EDHF的信号传导。高血压在眼部能引发多种病变，如视网膜动脉硬化；视网膜渗出、缺血；视网膜浆液性脱离等，最终导致视功能损害。本项目通过自发高血压大鼠(SHR)与年龄匹配的正常Wistar大鼠相比较，利用血管等长张力记录系统、分子生物学手段及细胞膜片钳技术研究高血压状态下眼动脉中EDHF量的变化、BKCa活性与平滑肌细胞膜静息电位之间的关系。为治疗高血压性视网膜病变以及眼部缺血性疾患提供理论依据。

高血压在眼部能引发多种病变，如视网膜动脉硬化；视网膜渗出、缺血；视网膜浆液性脱离等，最终导致视功能损害。关于高血压状态下眼部动脉结构和功能的变化，目前尚不明确。血管内皮源性超极化因子(EDHF)是目前公认的由血管内皮细胞产生的三种舒张因子之一，主要在外周血管发挥调节舒张作用。关于EDHF的自然属性、信号传导通路等，目前尚无定论。本项目利用大鼠眼睫状动脉，发现大电导的钙活化钾通道(BKCa)参与了EDHF的信号传导。进而，比较了自发高血压大鼠(SHR)与年龄匹配的正常Wistar大鼠(WKY)的眼睫状动脉舒缩功能。去甲肾上腺素100μM预先收缩眼睫状动脉，乙酰胆碱诱发血管产生浓度依赖性舒张。与年龄匹配的WKY相比，SHR的舒张力降低。将100μM L-NAME和10μM Indomethacin与血管共同孵育，然后用乙酰胆碱诱发血管产生舒张，此时的血管舒张为EDHF所介导。与年龄匹配的WKY相比，SHR眼睫状动脉EDHF介导的舒张降低。Iberiotoxin是BKCa通道的阻滞剂。无论是SHR还是WKY，Iberiotoxin完全抑制了EDHF介导的眼睫状动脉舒张。在静息状态下，血管与100μM L-NAME和10μM Indomethacin共同孵育，出现静息张力增高。Iberiotoxin 进一步增加了血管的静息张力，SHR静息张力的增加值小于WKY。另一方面，去甲肾上腺素浓度递增（1μM~100μM），诱发眼睫状动脉产生一组浓度依赖性收缩，SHR收缩力小于WKY。将100μM L-NAME与血管共同孵育，二者收缩曲线均抬高，但SHR小于WKY。10μM Indomethacin导致二者收缩曲线均降低，但SHR小于WKY。0.1μM Iberiotoxin导致二者收缩曲线均抬高，但SHR小于WKY。高血压状态下，大鼠眼睫状动脉肾上腺素能受体表达增强。对照血管收缩功能的结果，提示SHR眼睫状动脉对去甲肾上腺素的敏感性下降。关于SHR眼睫状动脉的组织学变化，通过与WKY相比较，SHR眼睫状动脉平滑肌层增厚，血管肌层厚度/血管内径的值明显增大，血管腔缩小。高血压使大鼠眼睫状动脉产生了功能及结构的异常，意味着眼部血流的自身调节遭到破坏。