走马胎中抗肿瘤活性成分三萜皂苷的提取分离和构效关系研究

走马胎又名大叶紫金牛，学名Ardisia gigantifolia Stapf,为紫金牛科紫金牛属植物，全株或根茎具有祛风湿壮筋骨、活血化淤、止血生肌等功效;其中皂苷类成分含量较高，现代药理研究发现走马胎根中三萜皂苷类化合物具有较强的抗癌活性。本项目拟在现有研究工作基础上，结合药物分子设计的理论，通过走马胎根茎乙醇提取物化学成分的分离、高含量的活性化合物走马胎皂苷LP3的结构修饰等手段，获得一定数量结构多样齐墩果烷型走马胎三萜皂苷衍生物。在此基础上，采用技术成熟的抗肿瘤体内外筛选模型对得到的化合物进行活性评价，优选出同时具有新结构和高活性的抗肿瘤药物先导物，为开发具有我国自主知识产权的新型药物奠定基础。

从走马胎中共分离得到14个奇墩果烷型三萜皂苷类化合物，其中有10个是新化合物，结构新颖的化合物的量超过了50%。为了进一步研究该类化合物抗肿瘤活性的构效关系，通过酸水解的方法将LP3水解成4个新化合物,用醋酐吡啶法合成了LP3的全乙酰化合物。用MTT法对上述13个化合物进行抗肿瘤活性筛选和构效关系研究，结果表明化合物LP3对MCF-7细胞的抑制活性是阳性药5-FU的十倍，这表明对于人乳腺癌细胞C-3位的5个糖的糖链，13-28环氧和C-30位的甲基是活性基团。LP3诱导MCF-7凋亡的机制可能与其干预氧化还原系统、周期阻滞和激活线粒体凋亡信号转导通路有关。体内研究表明，LP3能显著抑制裸鼠荷人乳腺癌细胞MCF-7实体瘤的生长。通过HPLC-MS初步确定了LP3在大鼠体内的代谢产物。因为用化学方法甲醇解后得到了13-28环氧和30位的醛基被破坏的产物，通过糖苷酶对LP3进行了初步水解试验。