FKBP12.6蛋白在他克莫司对脑缺血/再灌损伤保护中的重要作用

本研究旨在阐明FKBP12.6蛋白在他克莫司对脑缺血/再灌损伤保护中的重要作用。目前针对缺血性脑中风的治疗因为缺血再灌过程中细胞外K+离子浓度升高和去甲肾上腺素生成增多等原因导致血管收缩，削弱了血管再通术的效果，因此，寻求合理有效的辅助药物就成为长期以来研究的热点问题。文献表明他克莫司对脑缺血/再灌损伤有保护作用，而我们的前期工作表明FKBP12.6表达于血管平滑肌并特异性与2型雷诺定受体(RyR2)结合，他克莫司能使FKBP12.6与RyR脱离并产生钙火花，继而激活大电导钙依赖性钾离子通道（BK通道）。由于BK通道对脑血管平滑肌张力调节具有非常重要的作用,因此，我们推测FKBP12.6在他克莫司对脑缺血/再灌损伤保护中起着非常重要的作用。本项目将采用膜片钳、激光共聚焦显微扫描、基因敲除等技术，来证明我们上述的假设，为脑缺血再灌保护的研究提供新的靶点，为新药研制提供新的理论依据。

目的：目前针对缺血性脑中风的治疗主要是溶栓治疗，但是因为缺血再灌过程中细胞外K+离子浓度升高和去甲肾上腺素生成增多等原因导致血管收缩，削弱了血管再通术的效果，因此，寻求合理有效的辅助药物就成为长期以来研究的热点问题。本研究旨在阐明FKBP12.6 蛋白在他克莫司对脑缺血/再灌损伤保护中的重要作用。结果：① 他克莫司呈剂量依赖性对脑缺血再灌注损伤具有保护作用；②他克莫司对去内皮主动脉血管环具有舒张作用，该作用能被iberriotoxin（100 nmol/L）和Ryanodine 10μM部分阻断，且iberriotoxin（100 nmol/L）和Ryanodine 10μM的作用相当；③ 激光多普勒显示他克莫司有增加脑血流量的作用，该作用能被iberriotoxin 和Ryanodine 阻断；④ 他克莫司对胸主动脉平滑肌和脑动脉平滑肌细胞BK通道电流具有激活作用，且该作用能被iberriotoxin（100 nmol/L）和Ryanodine 10μM所阻断；⑤ 他克莫司能显著增加主动脉平滑肌和脑动脉平滑肌细胞钙火花的释放，该作用能被Ryanodine 10μM所阻断；⑥ 链脲佐菌素诱导Ⅰ型糖尿病大鼠，FKBP12.6蛋白显著降低，他克莫司对脑动脉平滑肌细胞BK通道电流激活作用显著减弱，他克莫司对脑缺血再灌损伤的保护作用大大减弱，同时对脑缺血再灌后血流量的增加作用大大减弱；⑦ 普萘洛尔处理链脲佐菌素诱导Ⅰ型糖尿病大鼠FKBP12.6蛋白显著恢复，他克莫司对脑动脉平滑肌细胞BK通道电流激活作用明显恢复，他克莫司对脑缺血再灌损伤的保护作用得到恢复，对脑缺血再灌后血流量的增加作用得到恢复。结论：FKBP12.6蛋白在他克莫司对脑缺血/再灌损伤保护中起着重要作用，其可作为脑缺血/再灌损伤保护的新靶点。