基质细胞衍生因子1a对内皮祖细胞衰老的影响及其机制的研究

本项目拟在前期的基质细胞衍生因子1a（SDF-1a）对内皮祖细胞（EPC）数量和功能影响的基础上，首先进一步观察SDF-1a体外干预对EPC衰老的影响。为明确其机制，先后观察SDF-1a对EPC端粒长度、端粒酶活性、NO活性及hTERT mRNA、eNOS、细胞周期调节因子CDK和p16INK4a表达的影响。然后采用化学抑制剂及siRNA抑制hTERT、eNOS和p16INK4a的表达，进一步明确端粒酶-端粒、PI3K/Akt/eNOS信号转导途径及p16INK4a在其中的作用；观察p16INK4a与端粒酶-端粒之间的可能关系。最后采用裸鼠颈动脉损伤模型，观察SDF-1a是否影响内皮祖细胞在体内皮修复能力。该研究对于深入系统的阐明SDF-1a对EPC功能的影响及机制，为进一步认识SDF-1a的生理效应及其信号转导机制提供理论依据。为缺血性心血管疾病提供了一种重要的、潜在的细胞治疗手段。

我们拟在前期的基质细胞衍生因子1a（SDF-1a）对内皮祖细胞（EPC）数量和功能影响的基础上，首先进一步观察SDF-1a体外干预对EPC衰老的影响。为明确其机制，先后观察SDF-1a对EPC端粒长度、端粒酶活性、hTERT mRNA、细胞周期相关蛋白表达的影响。然后采用化学抑制剂及siRNA抑制eNOS和hTERT的表达，进一步明确端粒酶-端粒、PI3K/Akt/eNOS信号转导途径在其中的作用，最后采用大鼠颈动脉损伤模型，观察SDF-1a是否影响内皮祖细胞在体内皮修复能力。我们发现SDF-1a抑制EPC的衰老，增加EPC增殖、迁移及克隆形成能力，促进EPC的内皮修复能力，其作用可能通过增加端粒酶活性，延长端粒长度，增加hTERT mRNA表达及调节p53/p21/p27等细胞周期相关因子表达。NFkB、PI3K/Akt/eNOS等信号通路参与SDF-1α对端粒-端粒酶及p53/p21/p27等细胞周期相关因子的调节。