锌指蛋白核酸酶定点突变番茄HP1基因提高果实色素研究

基因定点突变可在基因组原位改变基因特定序列，避免转基因中位置效应和插入失活。定点突变生物体不含转基因或标记基因，降低风险性。高等植物基因定点突变研究初见端倪，为基因原位功能研究、作物遗传改良和分子设计提供有效策略。利用锌指蛋白核酸酶（Zinc finger nucleases,ZFN）引入DNA断裂（double-strand break, DSB）可高效介导基因定点突变，使得ZFN在基因定点突变中倍受关注。本项目以番茄为受体植物，以番茄果实高色素合成关键基因HP1为靶基因，设计筛选合适的锌指蛋白，构建植物ZFN表达载体，通过非同源末端连接（NHEJ）进行基因定点突变。项目研究试图建立一种适合于蔬菜作物（番茄）的基因定点突变技术，通过对HP1不同位点突变分析其参与果实色素形成的关键位点，通过遗传分离获得不含转基因、仅有HP1部分位点突变的高色素番茄材料，具有重要的理论和实践意义。