肾周脂肪来源性瘦素参与肥胖相关肾病的发病机制探索与RNAi干预研究

Obesity-related glomerulopathy (ORG) is defined as obesity and proteinuria, along with glomerular hypertrophy or focal segmental glomerulosclerosis. Our previous study indicated that in perirenal adipose tissue (PART) of ORG rat model, PRAT-derived leptin protein expression increased. Furthermore, in vitro, PRAT-derived leptin promotes the proliferation of glomerular endothelial cells. Based on these knowledge, we hypothesize that PRAT-derived leptin may exacerbate ORG through paracrine mechanism, and RNAi technology may be used to silence leptin expression in local adipose tissue and improve kidney function in ORG animal. To further demonstrate our hypothesis, adeno-associated virus (AAV) containing leptin cDNA and leptin shRNA are constructed and injected to PRAT respectively, to overexpress leptin in local adipose tissue of leptin-deficient ob/ob mice, and to silence leptin expression in local adipose tissue of wild type ORG mice, and to finally illustrate that PART-derived leptin exacerbates ORG through paracrine mechanism, furthermore, RNAi technology can be used to treat ORG in future.

肥胖相关肾病(ORG)是以肥胖和蛋白尿为临床表现，伴肾小球肥大或节段性硬化的肾病。本项目组前期研究发现，肥胖ORG大鼠出现肾损伤的同时伴有肾周脂肪组织(PRAT)瘦素升高，离体实验显示PRAT来源性瘦素可刺激肾小球内皮细胞增殖。由于PRAT特殊的分布位置以及瘦素对肾脏的刺激增殖作用，推测：PRAT来源性瘦素可能通过旁分泌机制直接影响肾脏，参与ORG发生;另一方面, 可通过RNAi技术沉默肥胖ORG动物PRAT局部瘦素表达，改善肾损伤。本项目拟构建包含瘦素cDNA和shRNA的腺相关病毒载体，通过活体动物转染，分别将病毒载体注射至瘦素缺陷ob/ob小鼠和野生型肥胖ORG小鼠PRAT，过表达或沉默局部瘦素，研究PRAT来源性瘦素是否通过旁分泌机制独立于循环瘦素参与ORG发生，并观察RNAi技术对ORG的治疗效果；以完善ORG的发病机制研究，同时为利用RNAi治疗ORG提供理论支持及实验依据。

肥胖相关肾病(ORG)是以肥胖和蛋白尿为临床表现，伴肾小球肥大或节段性硬化的肾病。本项目组前期研究发现，肥胖相关肾病动物肾周脂肪组织分泌的瘦素可能参与肾脏损伤的发病过程。本项目通过高脂饮食喂养成功建立了肥胖相关肾病小鼠动物模型，并构建包含瘦素shRNA的腺相关病毒载体(AAV-shRNA leptin)，通过向肥胖相关肾病小鼠肾周脂肪组织注射AAV-shRNA leptin，沉默局部瘦素表达，观察小鼠体重、血压及肾功能的变化。结果显示，和高脂肥胖相关肾病对照组小鼠相比，当肥胖相关肾病小鼠肾周脂肪组织瘦素表达被抑制后，干预组小鼠的体重、收缩压、舒张压较高脂肥胖相关肾病对照组小鼠明显降低，且干预组小鼠24小时尿蛋白水平明显降低。本研究证实了：肥胖相关肾病小鼠肾周脂肪分泌的瘦素是导致小鼠发生肾病的重要危险因子，完善了ORG的发病机制，并进一步通过RNAi干扰的方式，抑制肥胖相关肾病小鼠肾周脂肪组织瘦素的表达，从而显著改善肥胖相关肾病小鼠的肾损伤，并为后续的基因干预治疗提供了理论基础，具有深刻的科学意义和较好的临床应用价值。