β-catenin对氧化应激所致人皮肤细胞衰老的保护作用及分子机制

β-catenin在氧化应激所致人皮肤衰老方面的机制研究必将开辟一个全新美容医学领域。我们前期发现，H202处理NHSFs能下调β-catenin的表达。在NHSFs中转染β-catenin可延缓H202诱导的NHSFs衰老表型，同时调控H202诱导的NHSFs衰老相关基因的表达。我们提出"β-catenin抗氧化应激所致的人皮肤衰老机制可能是通过激活FOXO3a、SMP-30或Tbx3或抑制p16INK4a的表达来实现的"工作设想。为了进一步证实该设想，我们通过H202,UVA，UVB处理NHSFs、KC拟建立人皮肤氧化应激衰老模型，探讨FOXO3a、SMP30、Tbx3、p16INK4a基因未处理或共同或分别沉默后，β-catenin对氧化应激诱导人皮肤细胞衰老的影响，以明确β-catenin对氧化应激所致的人皮肤细胞衰老保护机制。本研究可为抗氧化应激所致人皮肤细胞衰老提供一个新策略。

本课题组做了大量的工作，实验发现：.（1）氧化应激（H2O2）诱导的人皮肤成纤维细胞早期衰老模型中，β联蛋白的表达下调。.（2）我们在人皮肤成纤维细胞（NHSF）中转染pcDNA3.1-β联蛋白，然后H2O2处理，来研究高表达的β联蛋白对人皮肤成纤维细胞形态、细胞衰老相关β-半乳糖甘酶（SA-β-gal）、细胞活性氧（ROS）以及超氧化物歧化酶（SOD）的活性等衰老表型的影响。研究发现，高表达的β联蛋白对过氧化氢（H2O2）所致的人皮肤成纤维细胞衰老相关表型具有调控作用，即高表达的β联蛋白能够抑制SA-β-gal和ROS的表达，同时上调了SOD的活性。.（3）进一步的研究发现，高表达的β联蛋白可以上调FOXO3a、Tbx3、SMP30的表达，同时可以抑制p16INK4a基因的转录。通过该实验，我们推测，β联蛋白延缓H2O2所致的人皮肤成纤维细胞衰老的分子机制可能是通过上调FOXO3a、Tbx3或SMP30的表达，或是通过抑制p16INK4a基因的转录来实现的。.（4） 高表达的β联蛋白能够提高衰老的人皮肤成纤维细胞增殖活性。可以上调抗凋亡基因bcl-2的表达，下调促凋亡基因bax的活性，继而抑制衰老的人皮肤成纤维细胞的凋亡，从而达到延缓皮肤细胞衰老的作用。.（5）研究发现，在UVB诱导的皮肤衰老模型中，β联蛋白能够抑制p16INK4a、SA-β-gal和ROS的表达，同时上调了SOD的活性。实验证明，β联蛋白延缓UVB诱导的人皮肤成纤维细胞衰老的作用机制是依赖p16INK4a来介导的。.（6）检测 β-catenin 在不同年龄人群非曝光部位皮肤组织中mRNA和蛋白的表达水平，初步探讨β-catenin在人皮肤年代老化过程中的意义。我们发现随着年龄的增长 β-catenin 的表达水平随之减少，推测人皮肤年代老化可能与 β-catenin 的表达下调有一定的关联性。