基于“脾主肌肉”的葛根及其配伍对重症肌无力大鼠骨骼肌线粒体调控机制研究

Myasthenia gravis is the kind of complicated neurological disease with some symptoms,such as mynasthenia about eyes and full body.Myasthenia gravis can affect the patient's life even to be dead.The current research focus of Myasthenia gravis mechanism are the change of structure and function of Mitochondria of skeletal Muscle and the transcription of acetylcholine receptor antibody.On the base of the theory "Spleen is in charge of muscles",and with the relativity of "Myasthenia gravis" and "Wei Zheng",we think "disease of spleen and stomach" is the material basis of etiological factors of "Myasthenia gravis",and it's main performance is "Deficiency of both Qi and Blood" or "staganation of Dampness-Heat and Blood stasis".So we prefer the hypothesis of Myasthenia gravis mechanism with two accesses of "Spleen－Muscle－Mitochondria" and "Spleen－Muscle－acetylcholine receptor antibody",and the therapeutic methods with "replenish Qi to invigorate Spleen"and"clear away Heat-Dampness and promote Blood flow".So we study the effect of Radix Puerariae and it's compatibility to EAMG rat's effective mechanism in order to get the Myasthenia gravis mechanism and the therapeutic mechanism of Radix Puerariae and it's compatibility,and prefer the idea of the study of the Myasthenia gravis mechanism,prefer the basis of the effective formula of Myasthenia gravis,and prefer the chance of the diagnosis and treatment of the complitcated diseases.

重症肌无力是一种常见的神经科疑难病，以眼肌或全身肌无力为主要表现的自身免疫性疾病，严重影响患者生活质量，甚至危及生命。目前认为乙酰胆碱受体抗体介导、骨骼肌线粒体结构与功能的改变可能是其发病机制。故本研究基于"脾主肌肉"理论，结合重症肌无力与中医学"痿证"的相关性，认为重症肌无力的发病以脾胃功能失常为本，表现为气血不足或湿热、瘀血阻滞，进而提出重症肌无力的发病机制为"脾-肌肉-线粒体（气血不足）"，"脾-肌肉-乙酰胆碱受体抗体（湿热、瘀血阻滞）"之假说，遂拟定益气升阳、清热利湿活血为治法，确定兼具解肌与升津功效的葛根为主药，以实验性自身免疫性重症肌无力大鼠为研究对象，探讨葛根及其配伍组合对重症肌无力的作用机制，以期明确重症肌无力的发病机理与葛根及其配伍组合对该病的治疗机制，为探索重症肌无力临床发病机制研究提供思路，为开发重症肌无力治疗的有效方药奠定基础,并为运用中医理论诊治疑难病提供契机。

背景：重症肌无力属于中医“痿证”范畴，其发病与脾胃功能失常密切相关，“脾主肌肉”，全身的肌肉与脾密切相关，前期研究结果显示：葛根可促进胃肠平滑肌运动，故本研究以“脾主肌肉”理论为指导，探讨葛根及其配伍组合对重症肌无力大鼠的作用机制。 .主要内容：研究葛根及其配伍对EAMG大鼠临床症状、肌力、运动能力的改善，检测血清中乙酰胆碱受体抗体（AchR-Ab）表达、骨骼肌线粒体跨膜电位、神经肌肉接头部线粒体超微结构、神经生长因子（NGF）、成纤维生长因子（FGF）、胰岛素样生长因子（IGFs）以及白介素(IL)，肿瘤坏死因子α（TNF-α）、转化生长因子β（TGF-β）以及大鼠骨骼肌中线粒体ATPase的作用，以期明确葛根与哪一组药配伍能有效降低血清中乙酰胆碱受体抗体的含量、能有效促进肌肉生成调控因子的表达，改善重症肌无力大鼠线粒体的结构及功能。.重要结果及其意义：○1 AchR-Ab：与空白组比较，治疗前实验模型各组AchR-Ab的表达水平显著升高，统计学有明显差异（P＜0.01）；治疗后强的松组和中药各组大鼠的血清中AchR-Ab含量明显降低，与模型组比较有显著差异（p<0.05）；治疗后与强的松组比较，葛芪参妙组效果明显（p<0.05），其它中药组含量略高于强的松组，差异不明显。.○2线粒体超显微结构：治疗后强的松组和各个中药组的线粒体形态都有恢复，巨大线粒体减少，异性线粒体变少，线粒体嵴致密度相对较为均匀，结构较为清晰，排列规律性恢复较好，葛芪组和葛芪参妙组经过治疗后整体形态恢复较好。.○3肌肉生成因子：和空白组比较，FGF、NGF阳性表达IOD值显著降低（p<0.01）；和模型组比较，治疗组的阳性表达率都有所升高(p<0.01)；和强的松组比较，各中药组的阳性表达都比较高（p<0.05）；FGF表达各中药治疗组组间比较葛芪参妙组>葛妙组、葛参组、葛芪组>葛根组（p<0.05）；NGF阳性表达各中药治疗组组间比较葛妙组、葛芪参妙组>葛参组>葛芪组、葛根组（P＜0.05或P＜0.01）。.研究结果显示葛根及其配伍对重症肌无力治疗机制可能为通过对神经生长因子、成纤维生长因子以及胰岛素样生长因子的改变，改善骨骼肌线粒体的结构及功能，降低血清中乙酰胆碱受体抗体的表达，促进神经肌肉接头信息传递，缓解重症肌无力病情。