基于代谢组学的三维模式研究血脂灵片降脂作用的物质基础及作用机制

血脂灵片是治疗高脂血症的药典方药，临床疗效确切，但其药效物质基础和作用机制尚未明确。本课题以代谢组学研究方法为主线，以代谢终点表型小分子为对象，结合现代仪器分析，生物信息学，化学计量学，药效学等学科，提出基于代谢组学的方药指纹-药代标示物-药效靶标三维模式研究血脂灵片降脂作用的物质基础及作用机制。通过对方药代谢物组与方药的体内过程的药物代谢物组比较，获得药代标示物（PK-M）或代谢标示物（M-M）；分析正常大鼠、高脂血症模型大鼠和血脂灵片干预前后代谢组学及药效比较，寻找与降脂有关的靶标物质的变化规律；并开展相关性整合性研究，通过数据挖掘与处理，阐述血脂灵片对机体的调节机制，作用途径或靶点，代谢途径，进而明确血脂灵片降脂作用的物质基础及作用机制。该课题将代谢组学与中医药理论达到很好的融合，从现代科学的角度对方药的药效物质基础和作用机制研究提供新的方法。

血脂灵片为药典代表方，由制何首乌、决明子、山楂、泽泻四味药材组成，具有化浊降脂，润肠通便功效，用于痰浊阻滞型高脂血症。本课题基于代谢组学的方药指纹-药代标示物-药效靶标三维模式下，以高脂血症模型大鼠为研究对象，利用现代分析仪器手段，研究血脂灵片降血脂作用的物质基础和作用机制。.目的：（1）建立血脂灵片中单体成分的提取分离方法；（2）建立血脂灵片多指标检测方法，为药代动力学研究做准备；（3）研究血脂灵片在正常和高脂血症模型大鼠体内的药代动力学；（4）建立基于GC-MS的代谢组学技术平台，探讨血脂灵片作用机制；（5）探讨血脂灵片降血脂作用和靶点脂肪酸合成酶的关系。.方法：（1）提取分离血脂灵片四味药材中的单体化合物，并鉴定其结构；（2）利用UPLC-ESI-MS/MS技术，对血脂灵片中19种成分进行定性，其中17种成分进行定量；（3）利用UPLC-MS/MS技术，测定血脂灵片7种成分在正常和高脂血症模型大鼠中的血药浓度，绘制其药-时曲线，计算药动学参数；（4）利用GC-MS技术测定正常组、模型组和血脂灵片组大鼠内源性代谢物的变化；（5）利用紫外分光光度法，测定340nm下NADPH吸光度值的变化研究FAS在血脂灵片作用后的活性改变。.结果：（1）经鉴定共分离得到33个单体成分，其中3个成分首次分离得到。（2）利用UPLC技术定性了血脂灵片中19种成分，定量了17种成分，进行了成分及药材归属解析。（3）绘制血脂灵片在正常和模型大鼠体内的药-时曲线并计算药动学参数数据。（4）基于GC-MS技术的大鼠血浆代谢组学方法，结合药效学试验，确认19个生物标记物，血脂灵片对由高脂血症引起代谢物的变化有回调的功效；（5）血脂灵片对脂肪酸合成酶具有抑制作用，此作用通过抑制脂肪酸合成酶多个部位实现。.结论：本文对血脂灵片进行多指标药代动力学研究，结果表明血脂灵片在正常和模型大鼠体内均吸收较快，在模型大鼠体内吸收量增大，作用增强，消除减慢，生物利用度提高；且以7种PK markers的AUC0-∞自定义权重系数的整合药动学研究模型，所获参数能够最大程度上表征中药的整体处置规律；并从代谢组学角度，寻找与高脂血症相关的生物标记物，并阐述其对脂肪酸合成酶具有抑制作用，为中药作用机制研究提供一种新的方法。培养1名博士生，4名硕士生，发表8篇文章，其中1篇SCI文章，3篇核心期刊。