蚊视蛋白的抗药性新功能研究

连续、大量使用杀虫剂导致媒介昆虫产生了抗药性，抗药性已成为控制虫媒病的最大障碍。本室在前期研究中发现视蛋白基因在蚊对溴氰菊酯抗性品系中高表达，将视蛋白基因转染至蚊敏感细胞系后，蚊细胞对溴氰菊酯的敏感性降低，表明视蛋白直接参与了蚊溴氰菊酯抗性的形成。.本项目拟在本实验室相关工作基础上，进一步采用GST-Pull down法及质谱分析筛选与视蛋白相互作用的蛋白，采用RNA干扰，在蚊细胞系中鉴定与视蛋白相互作用的蛋白；分析视蛋白中与相互作用蛋白结合的蛋白结构域并定点突变，转染视蛋白突变体，在蚊细胞系中研究视蛋白的杀虫剂抗性机制，从而初步研究视蛋白在杀虫剂抗性中的功能。.本项目研究可望阐明视蛋白在杀虫剂抗性中的作用机制，具有重要的生物学意义及潜在的应用价值。视蛋白在杀虫剂抗性方面的新功能将有助于拓宽对媒介抗药性机理的认识，为控制媒介抗药性提供新思路。

连续、大量使用杀虫剂导致媒介昆虫对杀虫剂产生抗性，鉴定抗性基因及其相互作用可阐明抗药性分子机制。本实验室首次发现视蛋白对溴氰菊酯压力下的蚊细胞具有保护作用，但视蛋白如何参与杀虫剂抗性的机制，目前尚未见报道。. 本项目研究发现，Opsin及Arrestin同时在溴氰菊酯抗性蚊中高表达，进一步证实Opsin与Arrestin蛋白可直接相互作用。在蚊细胞中将Opsin分别高表达和低表达，对溴氰菊酯抗性及代谢抗性基因CYP6A1表达相应增高和降低，Arrestin基因表达未见变化，提示Opsin参与溴氰菊酯抗性可能与代谢酶CYP6A1有关。在蚊细胞中将Arrestin基因分别高表达和低表达，对溴氰菊酯抗性、CYP6A1及Opsin基因表达相应增高和降低；进一步在高表达Arrestin的蚊细胞内将Opsin低表达，对溴氰菊酯抗性及CYP6A1表达相应降低，提示Opsin可能受Arrestin调控，参与溴氰菊酯抗性机制。. 本研究首次发现Opsin可能受Arrestin调控，通过影响P450酶基因表达参与杀虫剂抗性，拓宽了对媒介杀虫剂机理的认识。