电针对CPSP大鼠小胶质细胞介导的p38MAPK信号通路的调控作用

Central Post-stroke pain (CPSP) is neuropathic pain caused by cerebral vascular damage induced hemorrhage or ischemia, Which occurs in the central nervous system injury and dysfunction after apoplexy. After CPSP, a variety of signals stimulate Microglia activation induced central sensitization occurs abnormal pain is the main reason of CPSP. This study plan to set up a rat model of CPSP, to observe variation in brain microglia through microglia specific marker OX-42 after electro-acupuncture therapy. Using double immunofluorescent labeling techniques, gel electrophoresis mobility shift technique, ELISA reaction and Western blotting analysis, to detect changes occurred in P38MAPK signaling pathway after microglia activation.Try to reveal EA "DU20"and "ST36"mechanism mediated by P38MAPK signaling pathway which induced by microglia activation. How to impact the EA effectiveness if selective use of p38MAPK pathway blocker ?This study provide a anovel rationale for central regulatory mechanism of EA therapy in CPSP.

脑卒中后疼痛（CPSP）是指在卒中后中枢神系统发生损伤及功能障碍而引起的疼痛，是由脑血管损伤导致出血或缺血引起，属于神经病理性疼痛范畴。小胶质细胞激活发生中枢神经敏化诱发异常疼痛是导致CPSP发生的主要原因。本研究拟通过建立CPSP大鼠模型，通过不同频率电针治疗优选最佳电针治疗参数，通过小胶质细胞特异性标记物OX-42观察电针治疗CPSP后脑内小胶质细胞的变化，运用免疫荧光双标技术、凝胶电泳迁移率变化分析技术、免疫吸附酶联反应和Western blotting方法 ，进一步检测小胶质细胞激活后P38MAPK信号通路的改变，试图从小胶质细胞活化的角度阐明电针“百会”、“足三里”穴所介导的P38MAPK信号通路治疗CPSP的作用机制，而选择性运用p38MAPK的阻断剂对电针治疗CPSP的效果产生怎样的影响？本研究的完成将为临床电针治疗CPSP的中枢调节机制提供理论依据。

脑卒中后中枢性疼痛（Central poststroke pain， CPSP）是指在卒中后中枢神系统发生损伤及功能障碍而引起的疼痛 。CPSP更常见是卒中发生在丘脑部位，其发生率约占脑卒中患者的8%-46%。 我们前期研究证实，大脑不同的分区与疼痛的关系，特别是大脑皮质和海马区与疼痛的产生有很大的关系。一方面胶原酶造模导致的脑卒中，使脑损伤，使丘脑内的神经元兴奋性异常激活，大脑皮质和海马区的神经元丢失，导致大脑皮质的疼痛感觉中枢紊乱而产生中枢性疼痛，激活β-catenin和COX-2的环路调控，加重疼痛。另一方面，脑损伤导致细胞凋亡增多，使星形胶质细胞大量激活，并且在损伤区域周围较多，在脑组织中有检测到P物质受体NK-1R，这说明细胞凋亡，星形胶质细胞的异常激活以及炎症相关因子都参与了脑卒中后中枢性疼痛的产生。电针治疗后，上述相关因子的表达减少，且疼痛明显缓解。本研究运用免疫荧光双标技术、免疫吸附酶联反应和Western blotting方法 ，研究中发现，低频电针治疗可减少神经细胞凋亡改善脑出血面积来抑制疼痛的产生；而高频电针治疗可下调星形胶质细胞，同时阻断β-catenin信号通路和降低炎症的发生来缓解疼痛的。并且我们发现高频电针的对CPSP大鼠的镇痛效果优于低频电针，所以本研究主要针对高频电针镇痛的可能信号机制进行深入研究，进一步检测小胶质细胞激活后P38MAPK信号通路的改变，试图从小胶质细胞活化的角度阐明电针“百会”、“足三里”穴所介导的P38MAPK信号通路治疗CPSP的作用机制。