miRNA-495对冠脉慢性完全闭塞病变侧枝循环形成的作用及机制研究

Chronic total occlusion (CTO) is a hotspot and a difficult point in the field of coronary therapy. Good collateral circulation can improve the symptoms and prognosis of patients. We performed miRNA sequencing on CTO patients with good collateral circulation and found that the expression of three miRNAs (miR-494/495/329) in the 14q32 miRNA gene cluster were significantly decreased. The effect of miR-495 on angiogenesis was not clear. Based on previous studies, we hypothesized that the expression of miR-495 in CTO patients is reduced, leading to an increase in the activation of Notch1, which in turn promotes angiogenesis and collateral circulation. This project intends to first confirm that miR-495 can participate in angiogenesis through Notch1 at the cellular level, and then confirm that miR-495 is involved in the formation of angiogenesis and collateral circulation in mice after lower limb ischemia. Finally, the circulating miR-494/495/329 expression will be explored for the diagnosis and prognostic value of collateral circulation and myocardial perfusion in patients with CTO. This project demonstrates the role and mechanism of miR-495 in the formation of collateral circulation in CTO patients through basic research on angiogenesis and the clinical study of CTO collateral circulation, providing a model and exploratory research basis for future clinical applications.

冠状动脉慢性完全闭塞（chronic total occlusion，CTO）是目前冠脉治疗领域的热点和难点，良好的侧枝循环可以改善患者症状和预后。我们对侧枝循环良好的CTO患者进行miRNA测序，发现14q32 miRNA基因簇的3个miRNA（miR-494/495/329）表达水平显著降低，其中miR-495对血管新生的作用尚不明确。在既往研究的基础上，我们提出假说：CTO患者miR-495表达水平降低，导致Notch1的活化程度升高，进而促进了血管新生和侧枝循环。本项目拟首先在细胞水平和小鼠体内证实miR-495可以通过Notch1参与血管新生，然后在人群中探讨循环miR-494/495/329水平对CTO患者侧枝循环和心肌灌注等指标的诊断和预后价值。本项目通过研究miR-495对CTO患者血管新生和侧枝循环的关系，为以后的临床应用提供范例和探索性研究基础。

背景：既往研究已证明侧支循环与慢性完全闭塞 (CTO) 患者心室功能改善有关。 microRNA (miRNA) 在侧支形成和 CTO 患者心肌灌注预测中的作用尚未得到研究。.方法：我们使用高通量测序评估了 CTO 和稳定性冠心病患者的循环 miRNA。 然后，我们进行了体外和体内研究，确定 miRNA 在内皮细胞血管生成中的作用。 最后，我们回到临床水平，研究了miRNAs是否可以预测CTO患者的心肌灌注。.结果：使用高通量测序共鉴定出 42 个差异表达的 miRNA。 在这些差异表达的 miRNA 中，我们观察到 miR-329、miR-494 和 miR-495 属于 14q32 miRNA 基因簇。 我们进而在更大的人群队列中证实miR-329、miR-494 和 miR-495 的表达下调。 在细胞研究中，我们发现 miR-495 通过内皮细胞中的 Notch1 通路抑制血管生成。 然后我们证实抑制 miR-495 会增加小鼠下肢缺血后的血管生成。 在人体研究中，miR-329、miR-494 和 miR-495 的表达在成功血运重建后心肌灌注改善的患者中显着低于没有改善的患者。我们采用受试者操作特征曲线和曲线下面积 (AUC) 用于评估 miR-329、miR-494 和 miR-495 表达对心肌灌注改善的预测价值，发现miR-329、miR-494 和 miR-495 的 曲线下面积 分别为 0.80、0.68 和 0.69。.结论：我们的数据表明 miRNA 参与 CTO 患者的侧枝形成，可能是帮助个体化治疗决策的潜在生物标志物。