新的p53靶基因TMEM在内质网应激中的细胞保护作用

许多应激状态下，细胞激活p53通路，进而选择性激活或抑制部分靶基因。不同于DNA损伤应答，目前人们对内质网应激与p53通路之间如何相互调控了解不多，对涉及内质网应激中细胞保护作用的p53靶基因知之更少。我们在前期工作证实，TMEM是新的p53的直接靶基因，编码内质网跨膜蛋白，高表达TMEM抑制内质网应激引起的细胞凋亡。本项目将采用核酸杂交，siRNA，免疫印迹，亲和层析，免疫共沉淀等分子和细胞生物学技术探讨TMEM在内质网应激中的作用及其分子机制，预期证明TMEM是内质网应激诱导的细胞保护因子，参与调控内质网应激状态下的p53功能，初步阐明TMEM的分子作用机制，结合临床肿瘤标本的检测，探讨其生物学意义。通过这一系列研究，有望发现新的肿瘤治疗靶点，为肿瘤靶向治疗提供新的策略。

p53的肿瘤抑制功能主要通过调控众多靶基因的转录来实现，参与细胞周期，DNA损伤修复，凋亡和代谢等过程，p53在内质网应激中作用了解不多。在本课题研究中，我们通过基因芯片发现TMEM是新的p53的直接靶基因，野生型p53和DNA损伤通过TMEM启动子上p53反应元件激活TMEM表达，而突变型p53不能激活。TMEM基因至少编码3个剪接变异体，TMEMa,TMEMb和 TMEMc，它们都是内质网跨膜蛋白。在TG和TM诱导内质网应激后，高表达TMEM抑制而敲低TMEM则促进细胞凋亡。TMEM敲低增加5氟尿嘧啶诱导的细胞凋亡，而且TMEM部分调控p53的转录活性。此外，我们还检测了淋巴瘤标本中TMEM的表达，探讨TMEM与淋巴瘤临床疗效预后的关系。