抑癌基因ARHI与孤儿受体TR3相互结合及在胃癌发生发展中的作用

肿瘤抑制基因ARHI属于ras超家族，对生长和发育有负向调节功能，并且能够与运输载体importins或转录因子直接结合，调控转录因子的细胞定位。核受体TR3具有调控增殖及凋亡的双重作用，并取决于其不同的亚细胞定位；TR3的亚细胞定位及生物学功能的发挥同其与多种蛋白分子的结合密切相关。本课题前期研究发现ARHI能调控TR3的亚细胞定位并下调其转录活性，初步实验表明二者直接结合。由此，我们推测ARHI蛋白是否通过与TR3直接结合，或是影响转运复合体形成的方式，影响TR3的核浆转运，从而对细胞的生长、凋亡产生进一步的生物学作用？我们将通过ARHI与TR3相互结合的研究，探讨二者的相互关系，检测ARHI对TR3生物学功能的影响及由此产生的生物学效应，以期阐明ARHI在核受体核浆转运中的作用机制，探讨ARHI的新功能，并对研究胃癌发生发展机制及靶向治疗略探讨，均具有重大的理论意义和潜在的医疗价值。

肿瘤抑制基因ARHI属于ras超家族，对生长和发育有负向调节功能，并且能够与运输载体importins或转录因子直接结合，调控转录因子的细胞定位。核受体TR3具有调控增殖及凋亡的双重作用，并取决于其不同的亚细胞定位；TR3的亚细胞定位及生物学功能的发挥同其与多种蛋白分子的结合密切相关。本课题首先明确了ARHI与核受体TR3直接结合，探讨了二者的结合模式；明确ARHI调控TR3的亚细胞定位抑制其转运入核，下调其转录活性，并由此参与细胞凋亡调控。随后进一步探索中，我们在MKN-28高分化胃癌细胞中应用si-RNA技术抑制ARHI表达后通过 MTT、Transwell小室及流式细胞术等方法检测表明，ARHI抑制了细胞增殖、迁移及抗凋亡能力，由此明确了ARHI的生物学功能。此外，我们从细胞水平及组织层面进行基因与蛋白表达情况检测，探讨了ARHI的表达情况，发现ARHI在肿瘤中低表达而非肿瘤中高表达并且与肿瘤的分化程度及TNM分期有关(P< 0.05), 而与患者的年龄性别、肿瘤发生部位及类型、是否淋巴结转移等均无明显统计学差异。本课题一方面明确ARHI通过蛋白质相互作用的方式，参与影响核受体TR3的生物学功能，为其发挥抑癌功能提供了相关分子机制；另一方面明确抑癌基因ARHI在胃癌中的表达情况，并统计分析其表达异常与胃癌患者临床病理特征之间的相关性。综上，本课题对以ARHI为靶点研究胃癌发生发展机制及靶向治疗策略，均具有重大的理论意义和潜在的医疗价值。.