CCL20基因修饰人角朊干细胞克隆筛选及其抗排斥作用研究

角朊细胞分泌的CCL20在招募朗格罕斯细胞迁移到表皮﹑启动机体对皮肤的移植排斥反应中起关键作用。角朊干细胞是组织工程皮肤种子细胞的良好来源。用CCL20基因下调修饰的角朊干细胞将培养出具有抗排斥作用的角朊细胞移植物。本项目以免疫磁珠法分选的人角朊干细胞为对象，采用RNAi技术构建CCL20-siRNA 表达载体﹑转染人角朊干细胞；用酶联免疫法或蛋白免疫印迹等技术筛选CCL20基因表达抑制的人角朊干细胞克隆, 制备成相应的人角朊细胞培养物；观察其异种移植后对受者朗格罕斯细胞向表皮迁移的影响，以及受者对角朊细胞移植物的排斥反应和存活时间。这将从间接抗原提呈途径的角度初步阐明CCL20在皮肤移植排斥反应中的作用，为低排斥反应的组织工程皮肤种子细胞提供一种新的来源，也对研发其它组织工程产品具有重要的参考价值。