IGFBP-6调控鼻咽癌转移的分子机制

Nasopharyngeal Carcinoma (NPC) is endemic in Southern east Asia and Southern China. The main cause of therapy failing is distant metastasis. We have found that IGFBP-6 could inhibit the proliferation of NPC cells and the IGFBP-6 gene interference could increase the ability of distant metastasis of NPC cell in vivo. The expression of IGFBP-6 was an related factor for NPC patients metastasis. Some study have showed that IGFBP-6 can closely integrate with IGF-Ⅱ and cause the regulating biological function. But the mechanism of IGFBP-6/ IGF-Ⅱregulate NPC is unclear. After the stable transfer IGFBP-6 in the NPC cell line 6-10B, we hope to study the molecular mechanism of IGFBP-6 regulate IGF-Ⅱ, the cell moving and invasion from the in vivo animal model. We also hope to detect the relationship between the IGFBP-6 and IGF-Ⅱ effected by the distant metastasis. Our study will make the molecular mechanism clear about NPC metastasis and provide the base for the new candidate target molecules.

鼻咽癌作为华南及东南亚地区的高发恶性肿瘤，其远处转移是鼻咽癌治疗失败的主要原因。我们前期研究证明IGFBP-6能够抑制鼻咽癌细胞株的生长增殖，体内动物实验显示IGFBP-6基因干扰后能够促进鼻咽癌细胞的远处器官的转移，其表达是晚期鼻咽癌患者远处转移的相关因素。有研究表明IGFBP-6能够与IGF-Ⅱ紧密结合，发挥对肿瘤的生物学调节作用。但IGFBP-6/ IGF-Ⅱ调控鼻咽癌转移的机制未明。我们希望通过IGFBP-6稳定转染低表达IGFBP-6的鼻咽癌低转移株6-10B，从信号转导通路方面探讨IGFBP-6调节IGF-Ⅱ的分子机制;细胞运动、侵袭等实验及体外实验模型观察IGFBP-6/ IGF-Ⅱ调控鼻咽癌转移的作用,检测鼻咽癌组织及血清中IGFBP-6及IGF-Ⅱ的表达的相关性及对远处转移的影响。为阐明鼻咽癌转移的分子机制奠定一定的理论基础，并为寻找新的候选靶分子提供一定的理论基础。

摘要：.研究背景：IGF是国内外目前的研究热点， IGFBP-6是IGF系统里结合蛋白的一类，能够通过与IGF-II特异性结合抑制其增殖作用。IGFBP-6在很多肿瘤系中可以检测到，如乳腺癌、肺癌、前列腺癌、结肠癌等。现有的研究试验证据表明IGFBP-6是一个潜在的抗癌新靶点，基因系列研究显示IGFBP-6的正向调节与抗增殖效应是一致的。体内外实验表明IGFBP-6能够抑制某些肿瘤细胞生长，包括结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌等。鼻咽癌是具有中国特色的恶性肿瘤。目前尚未有IGFBP-6与鼻咽癌相关研究的报道，我们希望对IGFBP-6与鼻咽癌关系进行深入的研究。.研究内容：.1..检测鼻咽癌患者病理组织中IGFBP-6的表达，并对IGFBP-6的表达与鼻咽癌临床特征与预后的关系进行探讨。.2..检测鼻咽癌细胞株IGFBP-6 mRNA的表达，ELISA检测IGFBP-6的自分泌；体外实验观察IGFBP-6对鼻咽癌细胞株增殖的影响；建立稳定转染CNE2-IGFBP-6 shRNA细胞，体内实验探讨IGFBP-6基因干扰后对鼻咽癌细胞转移能力的影响。.3..探讨IGFBP-6的可能作用机制，IGFBP-6与IGF受体的作用关系。.重要结果：.1..IGFBP-6的表达是鼻咽癌患者的局部区域复发及远处转移风险有关的因素，其阳性表达提示患者局部区域复发及远处转移风险降低。.2..鼻咽癌细胞株CNE2和HK-1均高表达IGFBP-6 mRNA。体外实验证明IGFBP-6能够抑制CNE2增殖能力，体内动物实验显示IGFBP-6基因干扰后能够在一定程度上促进鼻咽癌细胞CNE2的远处器官转移。.3..IGFBP-6的作用机制可能与抑癌因子PTEN以及IGF-I受体有关。.关键数据：.1..IGFBP-6表达阴性组和阳性组的5年总生存率分别为27％和73％（生存分析P＝0.007），5年无局部区域复发生存率分别为38％和75％（P＝0.001），5年无远处转移生存率分别为53％和89％（P＝0.002）。Cox模型多因素分析显示IGFBP-6的表达和总分期是影响总生存率、无局部区域复发生存率和无远处转移生存率的独立预后因素。.2..RT-PCR结果显示人鼻咽癌细胞株CNE1、HK-1、CNE2、HONE1、SUNE1、S-18、S-26均表达IGFBP-6 mRNA；荧光定量RT-PCR