肿瘤发生中激活POLD1基因异常表达的调控蛋白的研究

肿瘤是威胁人类生命和健康的首要敌人，其发病率在我国仍逐年上升。癌细胞的恶性与DNA的复制是密不可分的，因此认识DNA复制调控的机理对了解癌细胞恶性增殖至关重要。DNA聚合酶δ是DNA复制的关键酶，POLD1启动子的结合蛋白又是调控其表达的制约因素。因此本研究将利用DNA-亲和层析和蛋白组学方法分离鉴定癌细胞中调节POLD1启动子活性的已知或未知的调控蛋白；通过克隆编码基因，构建表达载体，定点突变POLD1顺式调控序列等分子生物学方法验证特异调控蛋白结合的特异性。本研究将应用分子免疫学方法及反义RNA试验，分析特异调控蛋白在癌细胞中对POLD1异常表达的调控作用，对乳腺癌细胞增殖的作用和癌的关系。同时通过研究它们相互作用的正常模式和在癌变细胞中所表现的系统动态差异，鉴定出可阻断癌细胞增殖的最有效的作用因子(靶点),为设计癌变阻断物直接导入B2B临床研究和新药开发提供确切的理论依据。