口腔癌相关成纤维细胞中Yes相关蛋白的核-质空间移位机制及应用研究

Yes相关蛋白（YAP）在恶性上皮细胞内的异常核-质空间移位具有促进或抑制肿瘤生长的双重作用，申请者前期研究首次发现：口腔癌旁微环境中的癌相关成纤维细胞（CAFs）若在核内表达YAP则具有高存活能力，并能促进肿瘤增殖的现象，但有关该现象的发生机制尚未阐明。由此，申请者提出口腔CAFs中也可能存在YAP的异常核-质空间移位现象并对口腔癌产生重要影响的新观点。本项目拟①采用基因沉默和过表达技术，明确核内表达YAP的口腔CAFs是否具有更强的促进肿瘤增殖的作用；②采用静态观察和主动干预的方法，研究Hippo等信号通路是否影响YAP的核-质空间移位，以了解其可能的发生机制；③采用体外培养细胞及小鼠肿瘤模型，观察干扰上述通路元件的抑癌效应。本研究将明确口腔CAFs中YAP的异常核-质空间移位的作用，为探索口腔肿瘤的防治措施提供新思路。

本课题组前期研究发现Yes相关蛋白（YAP）口腔癌旁微环境中的癌相关成纤维细胞（CAFs）若在核内表达YAP则具有高存活能力，并能促进肿瘤增殖的现象，但有关该现象的发生机制尚未阐明。由此，提出口腔CAFs中也可能存在YAP的异常核-质空间移位现象并对口腔癌产生重要影响的新观点。本项采用体外培养细胞及小鼠肿瘤模型发现CAFs具有促进肿瘤扩散的作用。在研究过程中查阅新近发表文献发现YAP对CAFs的表型维持很关键，ROCK抑制剂却能逆转表型，加之细胞通路之间的复杂交错对话等原因，改变研究方案，不再研究Hippo等信号通路是否影响YAP的核-质空间移位。但是，基于本课题组所做的研究，发现表达YAP的CAFs与表达平滑肌肌动蛋白-α（α-SMA）的CAFs不同于文献报道的属于一个群体，至少是不同的两个亚类。因此，后期研究放在对这两个CAFs亚类的研究上。免疫组化分析发现表达YAP的CAFs与表达α-SMA的CAFs位于不同的区域，表达YAP的CAFs与口腔癌的临床分期相关。另外，口腔癌中含有表达YAP的CAFs的病人在随访中有一人死亡，对照组无人死亡，但是两者未见统计学上的差异。细胞实验发现不是所有的CAFs都表达YAP，表达YAP的CAFs分泌的细胞因子的量较高，并且TGF-ß1能够促进YAP的异常核-质空间移位。因此，YAP可能是口腔癌CAFs更重要的表型，TGF-ß1是重要的诱导因子。本课题已发表1篇中文核心期刊，3篇SCI文章，其中1篇发表在《cancer research》杂志。培养硕士研究生3名，博士研究生2名。