SLC/CCR7介导靶细胞趋化作用与增殖活性信号间的串话机制

CCR7是七次跨膜G蛋白偶联的趋化因子受体，不仅表达在树突状细胞表面，而且在某些肿瘤细胞也表达；次级淋巴组织趋化因子SLC是其高亲和力配体。SLC与靶细胞上CCR7结合后可激活PI3K及MAPK等通路，诱导靶细胞趋化运动，使其定向迁移并聚集到周围淋巴组织或免疫反应部位。我们的预实验结果显示，除趋化作用外，SLC/CCR7还能诱发靶细胞增值，提示SLC/CCR7介导的靶细胞趋化作用与增殖活性信号间可能存在串话机制。本课题将运用Western blot、免疫共沉淀、荧光素酶检测等方法证实并初步阐明该串话机制，探讨某些细胞周期蛋白、PI3K下游的NF-κB通路是否参与其中，以及负调节因子p21表达反常性增高的机理。同时研究肝癌细胞CCR7表达情况及与肝癌转移、侵袭能力的相关性，尝试通过阻断SLC/CCR7通路抑制肝癌的转移侵袭，有望指导肝癌早期诊断，也可能为肿瘤生物治疗提供新的靶点。

CCR7是一个七次跨膜G蛋白偶联的趋化因子受体，主要表达在DC等细胞表面，SLC（CCL21）是其两个高亲和力配体。SLC/CCR7信号轴引发的DC生物学效应是其发挥抗瘤免疫功能的主要环节。在前期研究中我们发现SLC刺激骨髓源性DC（BMDC）后位于PTK信号通路上的细胞周期基因的表达都上调，同时上调的还有NF-κB信号通路相关基因。我们推测，除趋化作用外，SLC/CCR7信号轴还可能诱发BMDC增殖或成熟等生物学效应，故它们之间可能存在一条新的Cross-talking信号机制，NF-κB信号通路可能参与其中。 CCR7不仅表达在DC表面，而且某些肿瘤细胞也有表达。肿瘤细胞表达CCR7与其转移特性及恶性程度相关。检测肿瘤组织中CCR7的表达可能帮助早期判断肿瘤生物学行为，也可能为阻断肿瘤的转移侵袭提供新的干预靶点。.本课题证实了SLC/CCR7信号轴诱发的BMDC趋化、增殖和成熟等生物学效应，揭示并深入探讨了SLC/CCR7信号轴诱发的BMDC生物学效应之间存在的Cross-talk信号机制及其中间信号分子。实验结果显示，SLC对BMDC的趋化作用是通过CCR7受体实现的；SLC或ELC能上调细胞周期相关蛋白的表达，诱导BMDC增殖，还能通过促进CCR7的表达诱导BMDC成熟，且NF-κB p65 抑制剂PDTC能特异性阻断其增殖效应和成熟作用。SLC或ELC作用BMDC后NF-κB p65信号通路活化，促进NF-κB p65亚基入核后发生磷酸化，表明SLC/CCR7信号轴诱发的BMDC趋化、增殖和成熟作用通路间存在Cross-talking 信号机制，p-NF-κB p65可作为其中间信号分子。还发现负调节因子p21通过在此信号过程中反常性增强表达，参与SLC/CCR7介导的BMDC细胞周期调控。.该项目同时研究了肿瘤细胞CCR7的表达与肿瘤转移潜能的相关性，实验结果显示，肿瘤细胞CCR7表达与肿瘤的转移和侵袭能力正相关，并且通过体外阻断SLC/CCR7信号通路实现了对肿瘤转移、侵袭能力的抑制作用。我们发现CCR7在临床肿瘤组织芯片中呈现不同程度表达，且在恶性程度较高的肿瘤标本中高表达。分析表明，肿瘤细胞CCR7在肿瘤组织中的阳性表达百分比与癌症患者较差生存率相关。故肿瘤细胞CCR7的表达水平可作为肿瘤患者临床预后指标，也可能作为肿瘤生物治疗新的靶点。