腾冲嗜热厌氧菌半乳糖操纵子及其分子调控机制

在微生物中，半乳糖代谢大多数是通过Lelior途径完成的，该途径的基因可与其调控基因构成半乳糖操纵子。但是,目前有关嗜热微生物半乳糖操纵子的结构以及调控机制的研究甚少。腾冲嗜热厌氧菌可利用半乳糖为唯一碳源，是研究嗜热菌半乳糖操纵子的一个理想细菌。 基于基因组数据和生物信息学分析，腾冲菌半乳糖操纵子的物理位置和成员可大致确定，但是其生物学功能必须用实验手段给于挖掘和诠释。在本项目中，我们首先利用PCR和免疫化学结合的手段证实了腾冲菌半乳糖操纵子的结构完整性和基因表达产物；继而利用启动子活性体外分析和凝胶阻滞技术，确定了启动子的位置和调控蛋白结合区域；此外还采用分子生物学和生物化学方法，逐一地分析了该操纵子成员的蛋白质功能，同时检测在不同温度和不同碳源下操纵子基因表达的差异，试图发现其调控机制。本研究将建立一个新型的嗜热菌半乳糖操纵子模型，它可望为嗜热菌半乳糖代谢的普遍规律研究提供一种新思路。