基于PGC-1α/ERR-α共修饰和微重力反应器构建三维血管化肝组织的研究

针对肝组织工程血管化困难的问题，本项目拟以一种新的受控于氧与营养缺乏，但不依赖于缺氧诱导因子的血管生成调控途径即PGC-1α/ERR-α为实验依据，探索采用共表达PGC-1α/ERR-α的肝星形细胞株、微重力反应器、可降解三维支架材料和多细胞球形体相结合的方式进行肝组织的三维血管化研究。拟首先利用慢病毒表达载体构建稳定共表达PGC-1α和ERR-α的肝星形细胞株，研究其对血管内皮细胞的影响；微重力反应器内共培养肝星形细胞株、肝细胞、内皮细胞，确定三维内皮化多细胞球形体的培养条件；应用内皮化的支架材料进一步三维化多细胞球形体，形成三维内皮网的肝组织；在微重力反应器充分预血管化肝组织，动物体内移植进行肝组织的血管化研究，了解PGC-1α/ERR-α的促血管化作用；通过系统的血管化程度和肝细胞功能评价，建立具有三维血管和功能的肝组织有效培养方法，为肝组织工程辅助肝移植治疗研究提供新的实验依据。