III型干扰素诱导基因TRIM31与HBx的相互作用对HBV复制的调控机制研究

Interferon is one of the first-line drugs for the treatment of chronic hepatitis B, Interferon stimulation induces hundreds of interferon stimulated genes (IFN Stimulated Genes,ISGs) expression including TRIM31.The latest international research shows that TRIMs protein has a wide range of unique anti-viral activity. Studies have reported that HBV infection induces type III interferon but not type I or type II interferon, and type III interferon can inhibit HBV replication. However, the crosstalk of type III interferon and HBV is rarely reported. Our previous study found that TRIM31 was up-regulated by type III interferon, and TRIM31 bound to HBx protein and promoted the degradation of HBx, in addition, TRIM31 inhibited HBV replication. And our recent accepted article found that type III interferon can induce the expression of the transcriptional regulator CBFβ, which is IL-10 dependent, and CBFβ inhibits HBV replication. Therefore, this study will explore the role of IL-10 in type III interferon-induced TRIM31 expression, and further analyze the binding sites of TRIM31 and HBx, which might clarify the molecular mechanism of TRIM31 in inhibiting HBV replication, and lay the theoretical foundation for improving the clinical efficacy of interferon therapy.

干扰素是治疗慢性乙型肝炎的主要药物之一，干扰素可刺激机体细胞表达包括TRIM31在内的数百种干扰素诱导基因。国际最新研究进展表明TRIMs蛋白具有广泛而独特的抗病毒活性功能。有研究报道HBV感染机体后能够诱导III型干扰素而不能诱导I型和II型干扰素，且III型干扰素抑制HBV复制，而III型干扰素与HBV之间的相互作用鲜有报道。本研究前期实验发现：III型干扰素能够上调TRIM31，TRIM31能与HBx蛋白相互作用并降解HBx，且抑制HBV复制。申请人已接收文章发现III型干扰素能够诱导转录调控因子CBFβ的表达，此过程依赖于IL-10，且CBFβ抑制HBV复制。本研究将通过探讨IL-10在III型干扰素诱导TRIM31表达过程中的作用，并进一步分析TRIM31与HBx间的结合位点和具体作用方式，阐明TRIM31抑制HBV复制的分子机制，为改善干扰素疗法在临床上的治疗效果奠定理论基础。

干扰素是治疗慢性乙型肝炎的主要药物之一，干扰素可刺激机体细胞表达包括TRIM31在内的数百种干扰素诱导基因。国际最新研究进展表明TRIMs蛋白具有广泛而独特的抗病毒活性功能。TRIMs蛋白是如何抑制HBV复制的? HBV又是如何拮抗干扰素的治疗作用的？尤其是为何干扰素治疗只对部分HBV病人有效的？这些都是急待解决的科学问题。本项目以TRIM31为研究目标，研究干扰素刺激基因TRIM31抑制HBV复制的具体作用机制。由本基金支持的相关研究表明， TRIM31是III型IFN刺激基因，III型干扰素能够上调TRIM31，TRIM31与HBx有相互作用并且能够降解HBx。在某例HBV感染患者中的TRIM31突变后，阻断了其E3连接酶活性，TRIM31与HBx仍有相互作用，但是不能降解HBx，说明TRIM31发挥作用依赖于泛素化酶活性。随后我们将TRIM31蛋白分段，研究TRIM31与HBx具体相互作用区域，结果发现TRIM31的BBox区域和Ring区域在HBx降解过程中都是不可或缺的。TRIM31能够使HBx泛素化降解，实验结果表明，是在HBx上第K95位点发生的泛素化，从而使HBx降解。通过上述研究，进一步阐明了干扰素在治疗HBV病人中的分子机制，为深入探讨慢性乙型肝炎患者对干扰素治疗免疫耐受作用原理奠定基础， “跨越”免疫耐受限制，更有效地治疗慢性乙型肝炎提供新的思路，特别是为筛选特异的以HBx为靶标的小分子药物提供了很好的理论基础。