天然抗体3B4在抗白念珠菌感染中的作用及其机理研究

近年来随着免疫受损人群的不断扩大，真菌感染性疾病的临床意义越来越重要，其中白念珠菌是导致粘膜和系统性真菌感染的最常见的致病真菌。然而机体的抗真菌免疫应答，尤其是天然体液免疫应答机制尚未完全阐明。.本研究组在前期工作中获得了天然来源的单克隆抗体3B4，发现该抗体可以结合白念珠菌，抗体3B4转基因小鼠对系统性白念珠菌感染具有保护作用。本研究拟在此基础上，利用单克隆天然抗体3B4及其转基因小鼠，体外实验分析天然抗体对白念珠菌生长、黏附、调理吞噬等的影响，分析抗体3B4结合于白念珠菌的成分，体内实验观察抗体3B4在粘膜和系统性白念珠菌感染中的作用，并进一步分析表达天然抗体的B1细胞和边缘区B细胞在白念珠菌感染中的应答特点，对天然抗体在白念珠菌感染中的作用及其机制进行深入探索。本研究有助于进一步阐明天然抗体在白念珠菌感染中的作用，并为临床防治白念珠菌感染提供有益的思路。

近年来随着免疫受损人群的不断扩大，真菌感染性疾病的临床意义越来越重要，其中白念珠菌是导致粘膜和系统性真菌感染的最常见的致病真菌。然而机体的抗真菌免疫应答，尤其是天然体液免疫应答机制尚未完全阐明。本研究以单克隆天然抗体3B4为研究对象，利用已建立的3B4转基因小鼠TgVH3B4，对天然抗体在抗真菌感染中的作用及其机制进行了系列研究，取得了一系列重要创新性发现。我们发现转基因小鼠TgVH3B4血清抗白念珠菌IgM滴度显著高于对照小鼠，腹腔感染模型、血源播散感染模型和血清转移实验均发现TgVH3B4小鼠的存活率显著延长、肾脏组织菌落形成单位数显著低于对照小鼠，表明转基因小鼠TgVH3B4对白念珠菌感染具有很好的抵抗，而且这一保护作用主要是由血清中滴度增高的3B4抗体行使。体外实验发现单抗3B4可以以剂量依赖的方式抑制白念珠菌的芽管形成，并可以促进腹腔巨噬细胞对白念珠菌的吞噬。对单抗3B4结合成分的分析发现，单抗3B4特异性地结合于白念珠菌的芽管相表面的糖蛋白，对酵母相仅有轻微结合。在机制研究中，我们发现腹腔注射白念珠菌后，腹腔冲洗液中的白念珠菌数、炎症因子浓度、中性粒细胞数在TgVH3B4小鼠明显低于对照；接种白念珠菌后腹腔总IgM滴度较接种前略有升高，而白念珠菌特异性IgM在转基因小鼠显著升高；腹腔接种白念珠菌后转基因小鼠腹腔B1a细胞显著增多，较感染之前升高的更加明显；且B1a细胞和B1b细胞均有明显的增殖，其中分泌白念珠菌特异性抗体的B细胞数在转基因小鼠显著高于对照小鼠，而感染白念珠菌后增高更加明显；这些结果提示腹腔感染白念珠菌后B1细胞发生了抗原特异性的扩增，分泌高水平的特异性抗体发挥抗白念珠菌感染的作用。本研究首次揭示了天然抗体在抗白念珠菌感染中的作用，丰富了对天然体液免疫功能的认识，为临床防治白念珠菌感染提供有益的思路。